PLoS ONE: Polymorfier af glucose-reguleret protein 78 og risiko for kolorektal cancer: En case-kontrol undersøgelse i det sydvestlige Kina

Abstrakt

Glucose-reguleret protein 78 (GRP78), en endoplasmatisk reticulum chaperone, opregulering tjener som en effektiv mekanisme til at fremme malign transformation af kolorektal cancer (CRC) og beskytte CRC celler mod apoptose. For nylig har en analyse af grp78 polymorfier allerede fastslået, at GRP78 rs391957 polymorfi kunne forudsige det kliniske resultat i CRC patienter. Således testede vi, om grp78 polymorfier er relateret til risikoen for CRC. I denne undersøgelse, vi har registreret to GRP78 polymorfier (rs391957 (C T) og rs430397 (G A)) i 414 CRC tilfælde og 502 hospitalsbaserede cancer-fri raske kontrolpersoner i sydvestlige Kina ved hjælp af en polymerasekædereaktion-restriktion fragment længde polymorfi teknik. I forhold til CC-genotypen, bærere af CT og TT genotyper af rs391957 polymorfi havde højere risiko for CRC (odds ratio (OR) = 1,39, 95% konfidensinterval (CI) = 1,06-1,83 for CT genotype og OR = 2,10, 95% CI = 1,06-4,14 ​​for TT genotype, henholdsvis). I CRC tilfælde blev varianten T allel signifikant associeret med tumorinvasion etape (P = 0,030), men ikke med status af lymfeknuder metastase (P = 0,052). I forhold til GG-genotypen, bærere af GA og AA genotyper af rs430397 polymorfi havde højere risiko for CRC (OR = 1,63, 95% CI = 1,23-2,15 for GA genotype og OR = 2,92, 95% CI = 1,23-6,94 for AA-genotypen , henholdsvis). Den rs430397 polymorfisme var ikke forbundet med de klinisk-patologiske karakteristika CRC. Disse data giver det første bevis på, at GRP78 rs391957 og rs430397 polymorfier kunne tjene som markører til at forudsige risikoen for CRC

Henvisning:. Zhang D, Zhou B, Li Y, Wang M, Wang C, Zhou Z, et al. (2013) Polymorfier af glucose-Reguleret Protein 78 og risiko for kolorektal cancer: En case-kontrol undersøgelse i det sydvestlige Kina. PLoS ONE 8 (6): e66791. doi: 10,1371 /journal.pone.0066791

Redaktør: Valli De Re, Centro di riferimento Oncologico, IRCCS National Cancer Institute, Italien

Modtaget: Januar 15, 2013; Accepteret: 12. maj 2013; Udgivet: 20 juni 2013

Copyright: © 2013 Zhang et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne forskning blev støttet af tilskud fra Outstanding doktorafhandling Foundation of Undervisningsministeriets Kina (nr 2007B66). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Kolorektal cancer (CRC) er den tredje mest almindelige kræftform i verden, der tegner sig for ca. 10% af de samlede kræfttilfælde. Næsten 60% af de CRC tilfælde forekommer i de udviklede lande [1]. Imidlertid er forekomsten af ​​CRC stigende i de fleste udviklingslande, mens tendenserne enten stabiliserende eller faldende i de fleste af de udviklede lande [2]. Som et udviklingsland, har Kina oplevet en to til fire- fold stigning i forekomsten af ​​CRC i de seneste årtier [3]. Derudover de kinesiske Hans har signifikant højere forekomst af CRC end andre etniske grupper i Asien [4]. Patogenesen af ​​CRC er ikke fuldstændigt forstået, men det er helt sikkert en flertrinsproces kræftfremkaldende proces, hvor genetiske og epigenetiske ændringer akkumuleres sekventielt [5]. Gene polymorfier som genetiske variationer er blevet undersøgt allerede i mere end 35 forskellige gener, og for adskillige gener, der sammen med CRC observeret [6], [7].

Glucose-reguleret protein 78 (GRP78), også benævnt immunoglobulin tung kæde bindende protein, er et medlem af varmechokprotein 70-familien, som udtrykkes konstitutivt og ligger i første række i det endoplasmatiske reticulum (eR) [8], [9]. Som en stor ER chaperone, GRP78 letter proteinfoldning og samling, translokerer nysyntetiserede polypeptider tværs ER-membranen, forhindrer mellemprodukter fra sammenstille, målretter fejlfoldede proteiner til proteasom nedbrydning, binder Ca

2+ og tjener som en føler for ER stress [ ,,,0],10] – [12]. Desuden kan overekspression af GRP78 dramatisk induceret af ER stress herunder glucose deprivation, forstyrrelse af Ca

2+ homeostase, oxidativt stress og hypoxi, og derefter udløser udfoldet protein reaktion (UPR). UPR er en kompleks og multifacetteret signal-transduktion kaskade og tjener til at begrænse akkumuleringen af ​​ufoldede proteiner, som bidrager til at begrænse skaderne i celler udsat for ER stress og beskyttelse af celler mod dødsfald [9], [12] – [15].

Kræftceller er ofte konfronteret med hypoxi og glucose afsavn, og dermed på betingelse af eR stress med overekspression af GRP78. For nylig er blevet opdaget overekspression af GRP78 i flere cancertyper, såsom hjerne, brystcancer, lungecancer, prostatacancer, gastrisk cancer og CRC. Derudover har GRP78 blevet vist at være associeret med udviklingen og progressionen af ​​cancere. [16] – [23]. Der var beviser at angive, at GRP78 polymorfier, alene eller i kombination, havde virkning på ekspressionen af ​​GRP78 [24], [25]. Tidligere rapporter fandt, at GRP78 rs430397 polymorfisme var forbundet med risiko og prognose af hepatocelluar cancer (HCC) og prognosen af ​​ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) [26], [27]. I mellemtiden var det også kendt, at GRP78 rs391957 polymorfisme kan tjene som en potentiel prognostisk faktor for gastriske og kolorektal kræft [28]. Den nylige undersøgelse viste GRP78 rs391957 polymorfisme var forbundet med risiko for HCC, men resultatet forblev contradictive [29]. I øjeblikket vides der kun lidt om forholdet af grp78 polymorfier og tilbøjelighed til CRC, især i den kinesiske Han befolkning. Derfor vi hypotese, at GRP78 polymorfier også kan påvirke risikoen for CRC.

For at teste hypotesen, vi gennemført en case-kontrol undersøgelse i en kinesisk Han befolkning til at undersøge, om GRP78 polymorfier blev forbundet med risiko og klinisk-patologisk karakteristika CRC.

Materialer og metoder

undersøgelse emner

i alt 414 CRC tilfælde og 502 kræft-fri kontroller blev rekrutteret til dette case-kontrol undersøgelse. Patienterne blev udvalgt sekventielt fra januar 2009 til august 2009 på afdelingen for Gastrointestinal Surgery, West China Hospital, Sichuan University. Alle de sager havde nydiagnosticeret, ubehandlet primær CRC, der blev identificeret ved præoperativ koloskopi og CT-scanning, intraoperativ udforskning og postoperativ patologisk undersøgelse. Rektal cancer blev betragtet som tumoren placeret inden 15 cm afstand fra den anale, og det ikke-rektal coloncancer blev betragtet som tumoren placeret uden 15 cm afstand fra anal. Patienter med andre kræft historie og tidligere strålebehandling og kemoterapi blev udelukket. Alle de udvalgte sager blev enige om at deltage. Hospitalet-baserede kontroller blev tilfældigt udvalgt fra det samme hospital under rutinemæssige sundhed checkups, som var kræft-fri raske individer identificeret af koloskopi og CT-scanning. Kontrolgruppen matchede case gruppe i køn og alder. Alle deltagerne var uafhængige kinesiske Hans i sydvestlige Kina. Skriftligt informeret samtykke blev blodprøver og kliniske data indsamlet fra alle deltagerne ifølge protokollerne er godkendt af den etiske komité i West China Hospital Sichuan University.

DNA Udvinding og Genotypning

Genomisk DNA blev ekstraheret fra fuldblod af hver deltager ved konventionel procedure phenol /chloroform. Koncentrationen og renheden af ​​DNA blev målt med et spektrofotometer. Det isolerede DNA blev opløst i TE-buffer og opbevares i køleskab ved -20 ° C inden analyse. To grp78 polymorfier (rs391957 (C T) og rs430397 (G A)) blev genotypebestemt ved anvendelse af polymerasekædereaktion (PCR) -Indskrænkning polymorfisme teknik. Kort fortalt blev fremadrettede og reverse primere anvendt til PCR-amplifikation, og derefter de amplificerede produkter blev spaltet med restriktionsendonucleaser. Desuden blev længderne af PCR-produkter og de spaltede fragmenter bestemmes ved elektroforese på 1,5% agarosegel og 3% agarosegel, separat. Til genotype GRP78 rs391957 polymorfisme, PCR-primere var 5′-atctctcctgcgacttctga-3 ‘(fremad) og 5′-gatggaggaagggagaacaa-3′ (revers), og størrelsen af ​​amplificerede produkter var 167 bp. PCR-produkterne blev derefter fordøjet med restriktionsendonuklease MboII. Varianten T allel havde MboII restriktionssite- og to bånd (134 bp og 32 bp) blev genereret efter fordøjelsen, mens den vilde C allel manglede restriktionssted og et enkelt bånd (167 bp) blev opnået. Til genotype GRP78 rs430397 polymorfisme, PCR-primere var 5’-aattcaggacattgcatcta-3 ‘(fremad) og 5′-tggacagcagcaccatac-3’ (revers), og størrelsen af ​​amplificerede produkter var 271 bp. PCR-produkterne blev derefter fordøjet med restriktionsendonuklease Hin1III. Varianten En allel manglede Hin1III restriktionssted og et enkelt bånd (271 bp) blev opnået, mens den vilde G allelen havde begrænsningen stedet og to bånd (218 bp og 52 bp) blev genereret efter fordøjelsen. Desuden blev genotype-resultater valideret af direkte DNA-sekventering i en tilfældig 5% af prøver til kvalitetskontrol. Genotype konkordans var 100%.

Statistisk analyse

Beregninger for magt og prøve størrelsen af ​​vores case-kontrol design blev udført ved hjælp af PS-program software. Resultaterne viste, at antallet af rekrutterede prøver kunne give tilstrækkelig statistisk styrke. Afvigelse fra Hardy-Weinberg ligevægt for hver polymorfi blev testet ved hjælp af chi-square test blandt kontrollerne. Forskellene i demografiske karakteristika (fx køn og alder) mellem CRC sager og kontroller blev sammenlignet ved hjælp af chi-square og t test. De sammenslutninger af genotyper fordeling af grp78 polymorfier med klinisk-patologiske karakteristika af CRC sager blev evalueret ved brug chi-square test. Risiko estimater blev beregnet for de co-dominante og dominerende genetiske modeller ved hjælp den mest almindelige homozygot genotype som referent kategori. Virkningerne af genotyper af grp78 polymorfier på risikoen for CRC var repræsenteret odds ratio (OR) med 95% konfidensintervaller (CIS) ved hjælp af ubetinget logistisk regressionsmodel justeret for køn og alder. Alle statistiske tests var to sider, og P 0,05 blev betragtet som signifikant. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af PASW Statistics 18 (SPSS Inc., Chicago, IL).

Resultater

Af de anslåede allele yderste periferi af 1,38 og 1,60, vores studie med 414 CRC tilfælde og 502 matchede kontroller forudsat den statistiske styrke af 0,80 og 0,95 ved nominel type i fejlprocent på 0,05, hvilket viser, at vores prøver kunne yde tilstrækkelig magt til at identificere foreningen af ​​risikoen for CRC med de to GRP78 polymorfier. Den observerede genotyper frekvens fordeling af de to grp78 polymorfier i kontrollerne viste ikke signifikant afvigelse fra Hardy-Weinberg ligevægt (data ikke vist).

Karakteristik af studiepopulation

De demografiske og kliniske karakteristika af undersøgelsens deltagere blev opsummeret i tabel 1. Den gennemsnitlige alder var 59,0 (± 13,2) år og 58,2 (± 9,1) år i de tilfælde og kontroller hhv. De fleste af de sager og kontroller var mænd, og i de tilfælde køn ratio (mand /kvinde) var 1.39:1 mens forholdet var 1.5:1 i kontrollerne. Der var ingen signifikant forskel mellem de tilfælde og kontroller med hensyn til alder (P = 0,295) og køn (P = 0,592), hvilket indikerer, at den matchende til to grupper var vellykket. De fleste af CRC tilfælde var i NCCN trin II og III (288/412, 69,9%). Tumorer i de fleste CRC sager blev placeret i endetarmen (310/414, 74,9%).

Foreningen af ​​klinisk-patologisk Karakteristik af CRC Cases med de to GRP78 Polymorphisms

Association analyser mellem genotyper fordeling af de to grp78 polymorfier og klinisk-patologiske karakteristika CRC tilfælde blev vist i tabel 2. fordeling af varianten-allel-bærende genotyper (CT + TT) eller CC homozygot genotype GRP78 rs391957 polymorfi var signifikant associeret med tumorinvasion etape ( T1, T2, T3 og T4 fase) i CRC tilfælde (P = 0,030). Blandt patienter med varianten T allelen, 9,0%, 10,1%, 24,9% og 56,0% var i T1, T2, T3 og T4 fase, hvorimod 7,6%, 16,1%, 14,8% og 61,5% af patienterne med CC homozygot genotype var i T1, T2, T3 og T4 fase hhv. Der var en højere tendens til, at de variant T allel luftfartsselskaber havde mindre andel af lymfeknuder metastaser (37,6%) i forhold til de luftfartsselskaber med CC homozygot genotype (47,1%), selv om forskellen ikke var statistisk signifikant (P = 0,052). I mellemtiden, genotyper fordeling af GRP78 rs391957 polymorfisme var ikke forbundet med andre klinisk-patologiske data, såsom TNM stadie, fjernt metastase, tumor site, tumor differentiering og tumorvækst mønster i CRC tilfælde (P 0,05).

genotyper af de to GRP78 polymorfier blev forbundet med øget risiko for CRC

Logistisk regression analyser af genotyper af de to GRP78 polymorfier begge viste signifikante forskelle mellem de CRC tilfælde og kontroller i tabel 3. Sammenlignet med CC homozygot genotype GRP78 rs391957 polymorfi, CT heterozygote (Justeret OR = 1,39, 95% CI = 1,06-1,83, P = 0,018) og TT homozygot (Justeret OR = 2,10, 95% CI = 1,06-4,14, P = 0,033 ) genotyper blev begge signifikant associeret med højere risiko for CRC. De samlede variant T allel luftfartsselskaber (CT + TT) havde også signifikant højere risiko for CRC sammenlignet med de CC homozygote bærere (justeres eller = 1,45, 95% CI = 1.11-1.89, P = 0,006), hvilket tyder på, at den variant T allel GRP78 rs391957 polymorfi kan være en skadelig allel. Desuden blev lignende tendens med højere risiko for CRC påvist i analyser af genotyper GRP78 rs430397 polymorfi. I forhold til GG homozygot genotype, GA heterozygote (Justeret OR = 1,63, 95% CI = 1,23-2,15, P = 0,001) og AA homozygot (Justeret OR = 2,92, 95% CI = 1.23-6.94, P = 0,015) genotyper blev begge signifikant associeret med øget risiko for CRC. Den overordnede variant A allel luftfartsselskaber (GA + AA) havde også signifikant højere risiko for CRC sammenlignet med de GG homozygote bærere (Justeret OR = 1,70, 95% CI = 1,29-2,23, P 0,001), således variant A allel af GRP78 rs430397 polymorfi kan være en skadelig allel så godt.

diskussion

så vidt vi ved, er dette den første undersøgelse, som har undersøgt, om GRP78 rs391957 og rs430397 polymorfier er forbundet med risiko for CRC. I dette hospital-baseret case-kontrol undersøgelse, fandt vi, at CT-heterozygote, TT homozygot og kombineret (CT + TT) genotyper af GRP78 rs391957 polymorfi og GA heterozygote, AA homozygot og kombineret (GA + AA) genotyper af GRP78 rs430397 polymorfi blev begge signifikant associeret med øget risiko for CRC i en kinesisk Han population, tyder på, at de to grp78 polymorfier sandsynligvis spiller potentielle roller i udviklingen af ​​CRC.

i USA nye tilfælde med rektal cancer udgjorde ca. 40 % af tilfældene med CRC [30]. Vi fandt imidlertid, at 75% CRC’er fandt sted i endetarmen i vores tilfælde, hvilket var i strid med endetarmskræft regnskab for 40-50% i den samlede Han population. Vores data var den samme som i den tidligere undersøgelse om sydvestlige kinesiske befolkning af Wang

et al.

Hvor 77% CRC’er var rektal kræftformer i deres sager [31]. En mulig forklaring er forekomsten af ​​kræft bør være region-specifikke. På grund af den enorme område og stor bestand i Kina, livsstil og økonomisk udvikling er forskellige i forskellige regioner med forskellige følgesygdomme til forskellige kræftformer. Af denne grund, nu da vores undersøgelse med fokus på sydvestlige Han befolkning i Kina, den høje andel af endetarmskræft i vores tilfælde, som kan afsløre den epidemiologiske situation i CRC i det sydvestlige Han befolkning var sandsynligvis forskellig fra andelen af ​​endetarmskræft i den samlede Han population . På den anden side, som det sydvestlige Kina er en økonomisk underudviklet område, de fleste mennesker i det sydvestlige Kina ikke har råd til rutinemæssig screening for CRC. Derfor blev de fleste diagnosticerede tilfælde præsenteret som symptomatiske sygdomme. Mens endetarmskræft kan være mere indlysende end ikke-rektal tyktarmskræft, patienter med endetarmskræft har en større mulighed for at få undersøgelse og behandling end dem med ikke-rektal tyktarmskræft. Dette kan være en anden grund til stor andel af rektal cancer i vores tilfælde. Men på trods af alt dette, ville de helt sikkert proportioner endetarmskræft og ikke-rektal cancer i det sydvestlige Han befolkning har brug for yderligere undersøgelser i store og flere-centre studier. Derudover er forholdet mellem hanner til hunner med CRC i vores undersøgelse var 1.39:1, som også var svarende til den af ​​1.36:1 i den tidligere undersøgelse om sydvestlige kinesiske befolkning af Wang

et al.

[31] . Selv om vores forhold i CRC var højere end i USA, der er normalt godt afbalanceret mellem mænd og kvinder, vi fandt, at køn ration også bør være region-specifikke grund af forskelle i risikoadfærd og etniske grupper. Den tidligere undersøgelse, som viste de lavere satser observeret blandt kvinder sammenlignet med mænd kan være relateret til forskelle i risikoadfærd forbundet med kolorektal cancer, såsom rygning, og den forskellige effekt af fedme hos mænd og kvinder, påpegede også på det [32]. Således kan den højere andel af mænd til kvinder med CRC være repræsentanten for kønsfordelingen i det sydvestlige kinesiske befolkning.

Det er klart, at overekspression af GRP78 forekommer i forskellige menneskelige kræftformer og kræft cellelinjer, korrelerer med malignitet, metastase og dårlig prognose [13]. Den forhøjede ekspression af GRP78 øget WHO patologisk grad af primær astrocytoma, som kraftigt forudsagde patienternes prognose [16]. Ekspressionen af ​​GRP78 blev opreguleret i prostatacancerceller sammenlignet med godartet væv, og patienter med højere ekspression af GRP78 havde næsten dobbelt så stor risiko for at dø af prostatakræft sammenlignet med dem med svag ekspression [20]. GRP78 var stærkt udtrykt i mavekræft og syntes at være en uafhængig overlevelse prædiktor [21]. En tidligere undersøgelse rapporterede, at overekspression af GRP78 syntes at korrelere med histologisk alvorlighed fra det normale colon væv til colonadenom til coloncarcinom, hvilket indikerede, at overekspression af GRP78 kan være en markør for malign transformation af CRC [22]. Desuden viste en anden undersøgelse, at knockdown af GRP78 inhiberede proliferationen af ​​CRC-celler og øget apoptose af CRC celler in vitro, hvilket indikerede, at ekspressionen af ​​GRP78 kan forøge proliferationen af ​​CRC-celler og beskytte dem mod apoptose [23].

Flere undersøgelser har vist, at de polymorfier i promotoren for genet, vil kunne forbedre eller svække ekspressionen af ​​genet [33] – [35]. Den rs391957 polymorfisme er placeret i promotoren af ​​GRP78 genet [24]. Det er blevet bemærket, at rs391957 polymorfi ændrede ekspressionen af ​​GRP78 i celler under forskellige betingelser. Specifikt i normale celler, de variant T allel bærere havde lavere basal promotoraktivitet end CC homozygote bærere. Men i celler under forudsætning af ER stress, de variant T allel luftfartsselskaber havde signifikant højere udtryk for GRP78 end CC homozygote bærere [25]. Således variant T allel af GRP78 rs391957 polymorfi forbedrer formentlig udtryk for GRP78 i forskellige kræftformer og dermed påvirker udviklingen og progressionen af ​​kræft. Disse resultater stemmer overens med den tidligere undersøgelse, som viste, at CRC patienter med CT heterozygote eller homozygote TT genotyper havde en signifikant højere risiko for tumortilbagevenden sammenlignet med patienter med CC homozygot genotype [27]. Efterfølgende vores nuværende undersøgelse har lignende resultater, som viste, at variant T allel luftfartsselskaber havde højere risiko for CRC sammenlignet med de vilde C allel luftfartsselskaber. Tilsammen tilvejebringer disse data indledende støtte at varianten T allel af GRP78 rs391957 polymorfi kan være både en modtagelig markør og en prognostisk markør for CRC, og har en vigtig funktion i udviklingen og progressionen af ​​CRC grundet forøgelse af ekspressionen af ​​GRP78. Men nogle resultater stadig contradictive. Den seneste undersøgelse viste, at C allel af GRP78 rs391957 polymorfi var forbundet med øget risiko for HCC og C-allel bærere havde højere mRNA og protein ekspression af GRP78 i HCC [29]. Den mulige forklaring er, at betingelserne for ER stress er forskellige i forskellige former for kræft. Således er flere og yderligere undersøgelser er nødvendige for at opdage og bekræfte roller GRP78 rs391957 polymorfi.

Vi fandt også, at variant T allel af GRP78 rs391957 polymorfi var forbundet med lokal tumor invasion af CRC. Men på grund af den retrospektive design og relative antal af sager, der er involveret, yderligere potentielle biomarkør indlejret kliniske forsøg og celler og væv eksperimenter vil være nødvendigt at validere vores resultat og identificere, hvilken rolle rs391957 polymorfi spiller i udviklingen af ​​CRC. I vores undersøgelse T4 fase var størstedelen af ​​tilfældene. Tumor fase er ofte forbundet med manglende screening, adgang til lægehjælp og så videre. Således kan vores resultat viser også, at der er mangel på screening for CRC i det sydvestlige kinesiske befolkning. Patienter med CRC ikke kunne få hurtig diagnose, så de fleste af dem var på fremskredne stadier, når de fik en ordentlig behandling. Det er nødvendigt, at sydvestlige kinesiske være mere opmærksomme på rutinemæssig screening for CRC. Derudover tidligere undersøgelse fandt højere ekspression af GRP78 bidraget til øget lymfeknudemetastase i mavecancerpatienter [21]. I modsætning hertil fandt vi CRC patienter med varianten T allelen bidrager til højere ekspression af GRP78 kan have mindre mulighed for lymfeknudemetastase. Begrænsninger af vores lille stikprøvestørrelse vil sandsynligvis være årsagen. Alternativt roller GRP78 i at påvirke status for lymfeknude metastaser er forskellige i forskellige kræftformer.

variant T allel frekvens er ca. 29% i asiatiske befolkning, 36% i europæiske befolkning, 29% i USA og kun 9% i afrikanske befolkning. det faktum, at de fleste befolkninger deler tilsvarende fordeling af T luftfartsselskaber styrker således betydningen af ​​vores resultater og behovet for yderligere undersøgelse. Men etnicitet er af stor betydning i polymorfisme analyse og vores resultater har også brug for undersøgelser om andre etniske befolkningsgrupper til at bekræfte det i fremtiden.

De polymorfier i intron af gen har fået mindre opmærksomhed, men er begyndt at blive anerkendt for deres potentielle bidrag til udvikling og progression af sygdomme, herunder kræft [36]. Der er splejsning enhancer og splejsning dæmpende steder over hele intronerne af gener. Sekvensændringer i nogen af ​​disse intron steder kan føre til ændringer i splejsning af præ-mRNA, som bidrager til malign progression [37]. Den rs430397 polymorfi er netop placeret i opstrøms fra intron /exon grænsen inden den femte intron i GRP78 gen [36]. Den tidligere undersøgelse har for det første vist, at variant A allel af GRP78 rs430397 polymorfi var forbundet med højere risiko og dårlig prognose af hepatocellulært carcinom [26]. En anden undersøgelse har også påvist, at AA homozygote bærere havde højere RNA og protein ekspression af GRP78 sammenlignet med de GG homozygote bærere i væv, og at AA bærere havde dårlig prognose af ikke-småcellet lungekræft [28]. Mekanismen for GRP78 rs430397 polymorfi påvirker udvikling og progression af kræft er uklar. En hypotese er, at denne allel variation i intronen sandsynligvis ændrer splejsning af præ-mRNA og dermed påvirke ekspressionen af ​​GRP78 ved at ændre effektiviteten af ​​translation eller mRNA-stabilitet [36]. Resultatet af vores undersøgelse, som viste, at varianten A-allelen bærere havde højere risiko for CRC sammenlignet med CC homozygote bærere har tilvejebragt indirekte beviser til støtte hypotesen. Derfor kan varianten A-allelen kunne forbedre ekspressionen af ​​GRP78, men den videre funktion undersøgelser for at forklare den præcise mekanisme. Endvidere varianten En allel af GRP78 rs430397 polymorfi kan være en modtagelig markør for CRC, men om varianten A-allelen er forbundet med prognosen for CRC er stadig ikke kendt.

Der har været ca. 200 kendte polymorfier inden den GRP78 genet [36]. Baseret på tidligere undersøgelser blev polymorfismer af rs391957 og rs3216733 fuldstændigt bundet [25], og de polymorfier af rs391957, rs17840761 og rs12009 var i koblings-uligevægt mens haplotyperne af dem ikke var forbundet med CRC [28]. Desuden blev polymorfismer af rs17840761 og rs12009 ikke forbundet med CRC [28]. Derudover blev det ikke fundet, at andre polymorfier og rs430397 polymorfi var i koblingsuligevægt.

Konklusion

Der var signifikante sammenhænge mellem risikoen for CRC og grp78 rs391957 og rs430397 polymorfier. Både variant T allel af rs391957-polymorfi og variant A allel af rs430397 polymorfi var forbundet med højere risiko for CRC i det sydvestlige kinesiske Han befolkning, selv om den variant T allel af rs391957-polymorfi påvirket lokale tumorinvasion stadier og status lymfeknudemetastase behov at blive yderligere testet i prospektive studier større skala i fremtiden. Disse foreløbige resultater foreslået, at grp78 polymorfier kunne give spor til prognose modtagelighed for CRC. Men de præcise mekanismer bag sammenhængen af ​​grp78 polymorfier og CRC også brug for yderligere undersøgelse.

Tak

Vi takker Xueping Zhang, Su Peng og Yaling Zhang for deres bistand i indsamling af blodprøver, Keling Chen og Zhaoying Lu for deres laboratorium assistance.