Abstrakt
Målsætning
En systematisk gennemgang og en meta -analyse blev udført med henblik på at sammenfatte de nuværende offentliggjorte undersøgelser og vurdere LINE-1 hypometylering i blod og andet væv som en epigenetisk markør for kræftrisiko.
Metoder
en systematisk litteratursøgning i Medline-databasen ved hjælp PubMed, blev gennemført for epidemiologiske undersøgelser, der blev offentliggjort før marts 2014. random-effects model blev anvendt til at estimere vægtede gennemsnitlige forskelle (MDS) med 95% konfidensintervaller (CIS). Endvidere undergruppe analyser blev udført af prøvetype (vævs- eller blodprøver), cancertyper, og ved assays anvendes til at måle globale DNA methylering niveauer. Cochrane softwarepakken anmeldelse manager 5.2 blev anvendt.
Resultater
I alt 19 unikke genstande på 6107 prøver (2554 fra kræftpatienter og 3553 kontrolprøver) blev inkluderet i metaanalysen. LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere hos kræftpatienter end i kontroller (MD: -6,40, 95% CI: -7.71, -5.09; p 0,001). Den store forskel i methylering niveauer blev bekræftet i vævsprøver (MD -7,55; 95% CI: -9,14, -65,95; p 0,001), men ikke i blodprøver (MD: -0,26, 95% CI: -0,69, 0,17 ; p = 0,23). LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere i colorectal og gastrisk kræftpatienter end i kontroller (MD: -8,33; 95% CI: -10,56, -6,10; p 0,001 og MD: -5,75; 95% CI: -7,75, – 3,74; p. 0,001), mens, sås ingen signifikant forskel for leverkræft
konklusioner
den nuværende metaanalyse tilføjer nye beviser til den voksende litteratur om rollen som LINE-1 hypometylering i human cancer og viser, at LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere hos kræftpatienter end i kontrolprøver, især i visse typer kræft. Dette resultat blev bekræftet i vævsprøver, både friske /frosne eller FFPE prøver, men ikke i blod. Yderligere undersøgelser er nødvendige for bedre at præcisere, hvilken rolle LINE-1 methylering i specifikke undergrupper, overvejer både kræft og prøvetype, og målemetoder
Henvisning:. Barchitta M, Quattrocchi A, Maugeri A, Vinciguerra M , Agodi A (2014) LINE-1 hypometylering i blod og væv prøver som en Epigenetisk markør for Cancer Risk: en systematisk gennemgang og meta-analyse. PLoS ONE 9 (10): e109478. doi: 10,1371 /journal.pone.0109478
Redaktør: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japan
Modtaget: Juni 23, 2014, Accepteret: August 31, 2014; Udgivet: 2 oktober 2014
Copyright: © 2014 Barchitta et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres
Data Tilgængelighed:. Det forfattere bekræfter, at alle data, der ligger til grund resultaterne er fuldt tilgængelige uden restriktioner. Alle relevante data er inden for papir og dens Støtte Information filer
Finansiering:. Forfatterne har ingen finansiering eller støtte til rapporten
Konkurrerende interesser:. Manlio Vinciguerra har fungeret som en PLoS ONE Editorial Board medlem i tre år. Dette ændrer ikke forfatternes overholdelse PLoS ONE Redaktionelle politikker og kriterier.
Introduktion
Epigenetisk ændringer, arvelige DNA modifikationer, der ikke involverer ændringer i DNA-sekvensen, der er forbundet med ændringer i genekspression og er vigtige i at opretholde genomisk stabilitet [1]. Blandt epigenetiske mekanismer, DNA-methylering er den mest almindeligt undersøgt og involveret i forskellige biologiske processer, herunder cancer [2] – [5]. Global hypomethylering, en samlet reduktion i indhold DNA methylering hele genomet, er forbundet med genomisk ustabilitet og et øget antal mutationsbegivenheder [6]. Genomisk DNA hypometylering vil sandsynligvis resultere fra demethylering i repetitive elementer, der tegner sig for omkring 55% af det menneskelige genom og bestemme genregulering og genomisk stabilitet [7], [8]. Lange indflettede Nukleotid Element 1 (LINE-1) og Alu repetitive elementer er vigtige bestanddele af spredte DNA gentagelser. På grund af deres høje forekomst over genomet, har methylering i repetitive elementer vist sig at korrelere med den globale indhold genomisk DNA-methylering og demethylering er blevet forbundet med genom ustabilitet og kromosomafvigelser. Således har LINE-1 og Alu blevet anvendt som globale surrogatmarkører til estimering det genomiske DNA methylering niveau i cancervæv [6], [9] – [10] og i perifere blodleukocytter [11]. LINE-1 hypometylering blev observeret i adskillige typer cancer [12] – [14] og var forbundet med en dårlig prognose [15]. I en meta-analyse [11], blev global DNA hypometylering i perifere blodleukocytter forbundet med øget risiko cancer. En anden meta-analyse, undersøge genom-dækkende DNA methylering i perifert blod DNA og kræftrisiko, rapporterer en signifikant omvendt sammenhæng mellem genomiske 5-methylcytosin niveauer og kræftrisiko, men ingen samlede risiko forening hjælp surrogater for genomisk methylering, herunder methylering på LINE -1 og Alu repetitive elementer fandtes [16]. Formålet med denne undersøgelse var at foretage en mere omfattende systematisk gennemgang og en meta-analyse for at sammenfatte de nuværende offentliggjorte undersøgelser og vurdere LINE-1 hypometylering i blod og andet væv, som en epigenetisk markør for kræftrisiko.
Metoder
Søg strategi og udvælgelse
En søgning systematisk litteratur i Medline-databasen ved hjælp PubMed, blev udført for epidemiologiske undersøgelser, der blev offentliggjort før marts 2014 undersøger sammenhængen mellem LINE-1 hypometylering og kræftrisiko. Søgningerne var begrænset til studier skrevet på engelsk; abstracts og upublicerede studier blev ikke inkluderet. Litteratursøgning blev foretaget uafhængigt af to forfattere. Følgende udvælgelseskriterier blev brugt til at søge artikler og abstracts: ( “kræft” eller “tumor” eller “karcinom”) OG ( “LINE-1” eller “Lang spækket Element-1” eller “global”) OG ( “hypometylering” eller “methylering”). Desuden blev referencelisterne fra udvalgte artikler kontrolleres for at søge efter yderligere relevante undersøgelser. Ingen undersøgelser er blevet udelukket a priori for svaghed design eller datakvaliteten. Artikler blev medtaget i den kvantitative analyse, hvis de opfyldte følgende kriterier: (1) case-kontrol eller kohorte studiedesign; og (2) undersøgelser, der indberettede middelværdier og standardafvigelser (SD) af DNA methylering niveau hos kræftpatienter og i kontrolgruppen. Desuden var følgende udelukkelseskriterier: (1) undersøgelsen rapporterer kun resultater som medianen af methylering plan eller via grafisk display, eller 95% konfidensintervaller (CIS) med justerede odds ratio (OR) eller relative risici for kræftrisiko hos forsøgspersoner med det laveste niveau af global DNA methylering (tertil, kvartil eller decil) sammenlignet med gruppen med det højeste niveau, (2) undersøgelsen rapporterer kun gen-specifikke DNA-methylering analyse, og (3) oversigtsartikler.
Hvor der manglede data eller yderligere oplysninger var nødvendige, blev undersøgelsens forfattere kontaktet via e-mail.
de foretrukne emner til systematiske reviews og meta-analyse (PRISMA) retningslinjer for gennemførelsen af metaanalyse rapportering blev fulgt [17] .
Dataindsamling og udvinding
To af Forfattere uafhængigt revideret samtlige støtteberettigede undersøgelser og indvindes følgende oplysninger i et standardformat: første Forfatterens efternavn, udgivelsesår, land, hvor forsøget blev udført, studiedesign, kræft steder og typer, prøvetype, eksperimentelle metoder til at måle globale DNA methylering niveauer, antallet af sager og kontroller, middelværdier og SD globale DNA methylering niveauer for hver gruppe og de vigtigste resultater.
Statistisk analyse
Alle data blev analyseret ved hjælp af REVIEW MANAGER 5.2 software leveret af Cochrane Collaboration (https://ims.cochrane.org/revman).
random-effects model var anvendt til at estimere vægtede gennemsnitlige forskelle (MDS) med 95% CI [18], og således blev der taget nogen justering af de miljømæssige hensyn. Desuden undergruppe analyser blev udført af prøvetype (vævs- eller blodprøver), ved prøve kilde (frisk væv eller formalin-fikseret, paraffin-indstøbt, FFPE væv) ved kræft typer (kolorektal, mave, hepatocellulært), og ved analyser, der anvendes at måle globale DNA methylering niveauer. Forest plots blev genereret for at illustrere undersøgelsens specifikke effekt størrelser sammen med en 95% CI. Heterogenitet på tværs af studierne, blev målt ved hjælp af Q-test baseret på χ2 statistik, overvejer signifikant statistisk heterogenitet som p 0,1. Som Cochran test kun indikerer tilstedeværelsen af heterogenitet og ikke dens størrelse, vi også rapporteret I
2 statistik, som estimerer den procentdel af resultatet variabilitet, der kan henføres til heterogenitet på tværs af studierne. En I
2 værdi på 0% angiver ingen observerede heterogenitet, mens 25% er “lav”, 50% er “moderat” og 75% er “høj” heterogenitet [19]. Vi vurderede også mellem-studiet varians ved brug tau-squared (τ
2) statistik [20].
For at bestemme tilstedeværelsen af publikationsbias, symmetrien af tragten parceller i hvilket betyder forskelle blev plottet mod deres tilsvarende standardafvigelser blev vurderet.
Resultater
Dataudtræk
de detaljerede trin i systematisk gennemgang og meta-analyse proces er givet som en PRISMA flowdiagram i figur 1. i alt 324 artikler blev hentet fra databasen, blev en artikel tilsat gennem manuel søgning med referenceliste og dermed 46 papirer, udgivet mellem 2004 og 2014, blev inkluderet i den systematiske gennemgang og opsummeret i tabel 1 ved kræft hjemmeside eller type .
data egenskaber og kvalitetsvurdering
i alt 18 studier var fra asiatiske lande (40%), 13 fra de europæiske lande (28%), 13 fra USA (28%) og en fra Argentina og fra Egypten (2%, hver).
Tredive-otte retrospektive longitudinelle studier sammenlignet LINE-1 methylering niveauer mellem kræftpatienter og raske forsøgspersoner eller normale tilstødende væv i kræftpatienter. Otte prospektive longitudinelle studier analyserede LINE-1 methylering niveauer i kohorter af kræftpatienter, i forhold til den forventede levetid, resultatet af sygdommen eller malignitet af tumoren, identificere rolle LINE-1 hypometylering som biomarkør for dårlig prognose i kræftpatienter [15], [21] -. [27]
i 41 studier LINE-1 methylering niveauer blev evalueret både i tumor og raske kontrolpersoner væv, og i de resterende 5 studier kun i kræftpatienter.
Samlet set undersøgelserne påvist LINE-1 methylering niveauer i 15332 prøver: 8103 fra kræftpatienter (prøver 4679 væv, 3276 blodprøver, 72 mundskyl og 76 knoglemarv plasmaceller) og 7136 kontrolprøver (6277 fra raske forsøgspersoner og 859 fra normale tilstødende væv i kræftpatienter).
med hensyn til de eksperimentelle metoder til at måle LINE-1 methylering niveauer “gold standard” metode, der anvendes i 63% af undersøgelserne, var pyrosekventering af bisulfit konverterede DNA. Desuden brugte 9 undersøgelser kombineret bisulfit begrænsning analyse af LINE-1 (COBRA LINE-1) og 8 studier brugt andre metoder, dvs. sekventering, real-time PCR, AQAMA PCR, SAMMENLIGN methylering assay, MulticolorMethyLight Assay og MS-MLPA.
Den hyppigste tumortype i undersøgelsen var kolorektal cancer analyseret i otte undersøgelser [15], [21], [28] – [33], efterfulgt af syv studier, der evaluerede methylering niveau i gastrisk kræft [23], [ ,,,0],27], [32], [34] – [37], fem i hepatocellulært carcinom [25], [38] – [41], fire i blærekræft [1], [14], [42], [43] og hoved og hals karcinom [10], [44] – [46], to i lungekræft [47], [48] og brystkræft [24], [49], og enkelte undersøgelser vurderes methylering niveauer i renal celle kræft [ ,,,0],50], prostatacancer [51], neuroendokrin tumor [52], ovariecancer [53], thyroidcancer [54], esophageal cancer [26], cervical cancer [55], endometriecancer [32], hud melanom [22] , testikelkræft [56], leukæmi [57], myelomatose [58], paragangliom [59], fibrolamellar carcinom [60] og mave [61]. Fire studier evalueret methylering niveau i flere kræft sites [13], [28], [29], [32]. Med hensyn til assay-metode blev pyrosekventering anvendt i 29 studier, efterfulgt af COBRA i 9 studier, Real-Time PCR og AQAMA-PCR i 2 undersøgelser. MulticolorMethyLight Assay, MS-MLP, sammenligne og QUBRA blev vedtaget i enkelt undersøgelse hver.
Meta-analyse
Af de 46 udvalgte papirer, 14 rapporterede midler og SD af DNA methylering niveauer. Desuden blev midler og SDS uafhængigt beregnet ved hjælp af data fra 2 artikler og blandt Forfattere kontaktet for manglende data, 3 svarede til e-mail anmodninger og data blev tilsat i analysen [30], [50], [56]. Således blev 19 unikke genstande indgår i den kvantitative analyse. Endvidere to afhandlinger af Antelo et al. [28] og ved Pavicic et al. [32], rapporterede data fra forskellige typer kræft og dermed blev de adskilt i 4 og 8 sub-undersøgelser, henholdsvis (tabel 1)
I alt 6107 prøver blev inkluderet i analysen:. 2554 af kræft patienter (1127 vævsprøver og 1427 blodprøver) og 3553 kontrolprøver (2811 fra raske forsøgspersoner og 742 fra normale tilstødende væv hos kræftpatienter).
LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere hos kræftpatienter end i kontrol prøver (MD: -6,40, 95% CI: -7,71, -5,09; p 0,001). Men heterogenitet mellem studier var signifikant høj (I
2 = 99%) (figur 2), således, blev udført undergruppe analyse baseret på prøvetype (væv eller blodprøver). Den store forskel i methylering niveauer blev bekræftet i vævsprøver (MD -7,55; 95% CI: -9,14, -65,95; p 0,001), men ikke i blodprøver (MD: -0,26, 95% CI: -0,69, 0,17 ; p = 0,23)
undergruppe analyse baseret på prøvetype
En undergruppe analyse af prøve kilde blev gennemført… LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere hos kræftpatienter end i kontrolprøver i frisk og /eller frosset væv (MD -8,19; 95% CI: -10,54, -5,84; p 0,001) og i FFPE væv (MD: -6,96 ; 95% CI: -9,73, -4,20; p 0,001). Forskellene mellem forskellige undersøgelser, i de to undergrupper var signifikant høj (I
2 = 98% og 96% henholdsvis) (Figur 3).
Undergrupper analyse baseret på prøve kilde.
Desuden en undergruppe analyse af specifikke typer cancer, for colorectal, hepatocellulær og mavekræft, blev gennemført. LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere i colorectal og gastrisk kræftpatienter end i kontrolprøver (MD: -8,33; 95% CI: -10,56, -6,10; p 0,001 og MD: -5,75; 95% CI: -7,75, -3,74; p 0,001). Ingen forskel på LINE-1 methylering niveauer i blodet leukocytter blev observeret for leverkræft (MD: -5,76; 95% CI: -12,03, 0,51; p = 0,23). Forskellene mellem forskellige undersøgelser, i kolorektale og hepatocellulære undergrupper var signifikant høj (I
2 = 96%), og moderat højt i mavens undergrupper (I
2 = 66%) (figur 4).
Undergrupper analyse baseret på kræft type.
En undergruppe analyse af analyser, der anvendes til måling af methylering niveauer, og især mellem to almindeligt anvendte teknikker, pyrosekventering og COBRA LINE-1, blev udført. MDS for
pyrosekventering
COBRA LINE-1
undergrupper var -7,33 (95% CI: -9,06, -5,59; p 0,001) og -5,75 (95% CI: -7,13 , -4,37; p = 0,03), hhv. Heterogenitet mellem studier og i
pyrosekventering
undergruppe var signifikant høj (I
2 = 100%), og moderat højt i
COBRA
undergruppe (I
2 = 63% ) (figur 5).
Undergrupper analyse baseret på metoden.
En undergruppe analyse af prøvetype, især vævsprøver, og assay metode blev gennemført. MDS i undergrupperne af undersøgelser, der har konstateret LINE-1 methylering niveauer i vævsprøver gennem pyrosekventering og COBRA LINE-1, var -10,42 (95% CI: -12,93, -7,91; p 0,001) og -5,12 (95% CI : -6,33, -3,91; p = 0,10), hhv. Heterogenitet mellem studier og i
pyrosekventering
undergruppe var signifikant høj (I
2 = 97%), moderat højt i
COBRA LINE-1
undergruppe (I
2 = 56 %) (figur 6). Stratificering blandt undersøgelser, der påviste LINE-1 methylering i blodprøver blev ikke udført på grund af knapheden på studier.
Undergrupper analyse baseret på metoden.
Tragten plots indikerer små til moderate asymmetri, tyder på, at publikationsbias kan ikke helt udelukket som en faktor indflydelse på den nuværende meta-analyse (figur 7-12).
undergruppe analyse baseret på prøvetype.
undergruppe analyse baseret på væv prøvetyper. SE, standardafvigelse, MD, betyde forskel.
Undergruppe analyse baseret på kræftform i blodprøver.
Undergruppe analyse baseret på kræftform i vævsprøver.
undergruppe analyse baseret på påvisning metode i blodprøver.
undergruppe analyse baseret på påvisning metode i vævsprøver.
diskussion
Det lave niveau af DNA-methylering i tumorer i forhold til DNA-methylering niveau i deres normale væv modstykker var en af de første epigenetiske ændringer kan findes i human cancer [62]. Tabet af methylering skyldes primært hypometylering af repetitive DNA-sekvenser og LINE-1 elementer er typisk stærkt methylerede i normale væv, mens LINE-1 hypometylering er blevet rapporteret i kræft væv. Endvidere Liao et al. [50] rapporterede, at LINE-1 methylering, målt i leukocyt DNA, var signifikant højere i nyre kræftpatienter end hos raske forsøgspersoner.
To nylige metaanalyser blev udført med henblik på at vurdere den samlede kræftrisiko efter global DNA hypometylering i blodleukocytter. Den meta-analyse af Woo og Kim [11] rapporterer, at den globale DNA hypometylering af blod leukocytter var forbundet med øget risiko kræft, selv om foreningen varieres ved de eksperimentelle metoder (% 5-methylcytosin metode, LINE-1 med pyrosekventering og methyl accept assay), den region af DNA målrettet og cancertype. En opdateret metaanalyse udført af Brennan og Flanagan [16] angiver en signifikant omvendt sammenhæng mellem genomiske 5-methylcytosin niveauer og kræftrisiko (OR = 3,65; 1.20-6.09), men ingen samlede risiko forening for undersøgelser med anvendelse af surrogater for genomisk methylering, herunder methylering på LINE-1 gentagne element (OR = 1,24; 0,76-1,72). Især de to foregående metaanalyser omfattede undersøgelser rapporterer association analyse mellem blod methylering niveauer og kræftrisiko, men ikke vurdere undersøgelser rapporterer forskelle i gennemsnitlige methylering niveauer i blod og i andre væv. Den nuværende meta-analyse af de seneste rapporter blev gennemført herunder undersøgelser rapporterer methylering niveauer i blod og i andre væv. Denne meta-analyse vedrørte 19 unikke genstande, men da to artikler omfattede mere end en undersøgelse foretaget på forskellige patientpopulationer, alt var der 29 ikke-unikke studier inkluderet. På i alt 2554 prøver fra kræftpatienter og 3553 kontrolprøver, denne meta-analyse rapporter, der betyder methylering niveauer i kræftpatienter var signifikant 6,4% lavere end i kontrolprøver.
Sammenhængen mellem kræftrisiko og global DNA methylering er blevet overvejende undersøgt i blodprøver, fordi høst tumorvæv er invasiv og kan ikke rutinemæssigt udført. flere undersøgelser har imidlertid rapporteret, at methylering af repetitive elementer er vævsspecifik, mest variable i tumorvæv, og er ikke korreleret mellem tumor og blod [63] – [65]. Konsekvent, beviser viser, at genomisk hypometylering i tumor og normal tilstødende væv af blære- og koloncancer ikke kunne påvises i blod [43], [66], hvilket antyder, at hypomethylering er begrænset til det sygdomsramte væv. Interessant i denne metaanalyse den betydelige forskel i gennemsnitlige methylering niveauer blev bekræftet kun i vævsprøver, både friske /frosne eller FFPE prøver, men ikke i blodprøver. Desuden metaanalysen fremlagt tilstrækkeligt bevis for, at LINE-1 hypometylering, øger i tyk- og gastrisk cancer. Tværtimod blev ingen overordnet forening fundet til hepatocellulært carcinom. Især alle undersøgelser, der fokuserer på kolorektal og gastriske tumorer evalueret LINE-1 methylering i vævsprøver, mens alle de inkluderede studier af hepatocellulært carcinom undersøgte foreningen kun blod leukocyt prøver. Global DNA-methylering kan måles ved direkte og indirekte kvantificering assays. Selv om måling af procentdele af 5- methylcytosin at estimere globale DNA methylering indholdet er meget kvantitativ og reproducerbar, kræver høj mængde DNA og er ikke egnet til store epidemiologiske undersøgelser. Pyrosekventering med bisulfit behandlede DNA, “gold standard” for methylering af DNA-analyse [67], [68], er et højt gennemløb og nøjagtig metode øjeblikket er til rådighed til måling LINE-1 methylering som surrogatmarkør for global DNA hypometylering. Dog kan LINE-1 methylering varierer afhængigt af målet CpG sekvens opdaget [69], hvilket er en vigtig faktor i foreningen studiet med kræftrisiko. I nærværende metaanalyse, overvejer de to mest anvendte påvisningsmetoder (pyrosekventering og COBRA LINE-1) begge undergrupper rapporterer signifikant lavere LINE-1 methylering niveauer i kræftpatienter end i kontrolprøver, selvom heterogenitet mellem studier var signifikant højt i
pyrosekventering
undergruppe og moderat højt i
COBRA
undergruppe.
de vigtigste begrænsninger i denne meta-analyse er det lille antal studier inkluderet (n = 19) og høj heterogenitet på tværs af studierne. Selv om en tilfældig effekt model blev udført, for at tage hensyn til den høje heterogenitet, de samlede estimater skal fortolkes med forsigtighed. For at overvinde dette problem, blev samlet skøn beregnet i mere homogene delmængder af undersøgelser (undergrupper analyse). Desuden blev den mulige eksistens af en publikationsbias overvejes. Undersøgelse af tragt parceller viste små til moderate asymmetri, hvilket tyder på, at offentliggørelse partiskhed ikke helt kan udelukkes, og kan have haft mindst en moderat effekt på de sande effekt størrelse skøn. Faktisk blev nogle data, såsom konference abstracts, ikke-engelsk litteratur, upublicerede data og andre inkonsekvent rapporter efter vores udvælgelseskriterier udelukket. Desuden methylering risiko forening tendens kun skal indberettes, hvis det afslører statistisk signifikante resultater, og hvis forfatterne skønner analyse passende [16].
Da de fleste undersøgelser (83%) havde en case-kontrol design der er behov for store kohortestudier for at afklare, om den globale hypometylering er en tidlig kræftfremkaldende aberration eller en effekt af carcinogenese [11].
som konklusion, den nuværende metaanalyse tilføjer nye beviser til den voksende litteratur om rolle LINE-1 hypometylering i human cancer og viser, at LINE-1 methylering niveauer var signifikant lavere hos kræftpatienter end i kontrollerne, især for visse typer kræft. Dette resultat blev bekræftet i vævsprøver, men ikke i blodet. Yderligere undersøgelser er nødvendige for bedre at klarlægge, hvilken rolle LINE-1 methylering i specifikke undergrupper, overvejer både kræft og prøvetype, og målemetoder.
Støtte oplysninger
Tjekliste S1.
PRISMA Tjekliste
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109478.s001
(DOC)
Tjekliste S2.
Meta-analyse på Genetic Association Studies Tjekliste
doi:. 10,1371 /journal.pone.0109478.s002
(DOC)
Tak
Forfatterne vil gerne takke Forfattere A. Goel og K. Hur og kolleger, LM Liao og LE Moore og kolleger og MH Greene og L. Mirabello og kolleger for at støtte flere data ikke er rapporteret i deres artikler.
Leave a Reply
Du skal være logget ind for at skrive en kommentar.