PLoS ONE: Chemoprevention af hudkræft med 1,1-Bis (3′-lndolyl) -1- (Aromatiske) Metan Analog gennem induktion af Orphan Nuclear Receptor, NR4A2 (Nurr1)

Abstrakt

Baggrund

Formålet med denne undersøgelse var at demonstrere mod hudkræft og kemoforebyggende potentiale 1,1-bis (3′-indolyl) -1- (p chlorphenyl methan) (DIM-D) ved anvendelse af en in vitro model.

Metoder

In vitro cytotoksicitet og levedygtighed blev udført i A431 humane epidermoide carcinom cellelinie og normale humane epidermale keratinocytter (NHEK) henholdsvis krystalviolet farvning. Apoptose induktion i A431-celler (DIM-D behandlet) og NHEK-celler forbehandlet med DIM-D (2 timer) før UVB-bestråling, blev vurderet. Ophobning af reaktive ilt arter (ROS) i DIM-D forbehandlet NHEK celler (2 timer) før UVB eksponering blev også bestemt. Immuncytokemi og western blot analyse blev udført for at bestemme spaltede caspase 3 og DNA skader markører i DIM-D behandlede A431 celler og i DIM-D forbehandlet NHEK celler før UVB-bestråling.

Resultater

IC50-værdier af DIM-D var 68,7 ± 7,3, 48,3 ± 10,1 og 11,5 ± 3,1 pM mens for epigallocatechingallat (EGCG) var 419,1 ± 8,3, 186,1 ± 5,2 og 56,7 ± 3,1 pM til 24, 48 og 72 timers behandlinger hhv. DIM-D udviste en signifikant (p 0,05) højere induktion af DNA fragmentation i A431-celler sammenlignet med EGCG med procent celledød på 38,9. Desuden DIM-D inducerede højere ekspression i A431-celler sammenlignet med EGCG af spaltet caspase 3 (3,0-fold vs. 2,4-fold ændringer), Nurr1 (2,7-fold vs. 1,7 gange ændringer) og NFKB (1,3 gange vs . 1.1-fold ændringer). DIM-D udviste også kemoforebyggende aktivitet i UVB-bestrålet NHEK-celler ved signifikant (p 0,05) reduktion UVB-induceret ROS-dannelse og apoptose sammenlignet med EGCG. Derudover DIM-D induceret ekspression af Nurr1 men reduceret ekspression af 8-OHdG betydeligt i UVB-bestrålet NHEK celler sammenlignet med kun EGCG og UV.

Konklusion

Vores resultater tyder på, at DIM-D udviser Nurr1-afhængig transaktivering ved induktion af apoptose i A431-celler, og det beskytter NHEK celler mod UVB-induceret ROS-dannelse og DNA-skader

Henvisning:. Boakye CHA, Doddapaneni R, Shah PP, Patel AR, Godugu C , Safe S, et al. (2013) Chemoprevention af hudkræft med 1,1-Bis (3′-lndolyl) -1- (Aromatiske) Metan Analog gennem induktion af Orphan Nuclear Receptor, NR4A2 (Nurr1). PLoS ONE 8 (8): e69519. doi: 10,1371 /journal.pone.0069519

Redaktør: Rajvir Dahiya, UCSF /VA Medical Center, USA

Modtaget: 8. maj 2013; Accepteret: 11 Juni 2013; Udgivet: 7. august, 2013