PLoS ONE: c-myc Copy-nummer Gain er en uafhængig Prognostisk faktor i patienter med kolorektal cancer

Abstrakt

Baggrund

Formålet med denne undersøgelse var at bestemme forekomsten og klinisk-patologisk betydning af

c-myc

gen kopi-nummer (GCN) gevinst i patienter med primær kolorektal cancer (CRC).

Metoder

c-myc

GCN blev undersøgt i 367 konsekutive CRC patienter (kohorte 1) ved hjælp af dual-farve sølv

in situ

hybridisering. Derudover at vurdere den regionale heterogenitet, vi undersøgte CRC væv fra 3 steder, herunder den primære cancer, fjernmetastaser, og lymfe-knude metastaser i 152 avancerede CRC patienter (kohorte 2).

KRAS

exon 2 og 3 blev undersøgt for mutationer.

Resultater

I kohorte 1,

c-myc

genamplifikation, defineret ved en

c-myc

: centromer af kromosom 8-forholdet ≥ 2,0, blev påvist i 31 (8,4%) af 367 patienter. En

c-MYC

GCN gain, defineret ved ≥ 4,0

c-MYC

kopier /kerne, blev fundet i 63 (17,2%) patienter og var forbundet med dårlig prognose (

P

= 0,015). Multivariat Cox regressionsanalyse viste, at hazard ratio for

c-myc

GCN gevinst var 2,35 (95% konfidensinterval, 1,453-3,802;

P

0,001). I en undergruppe af fase II-III CRC patienter,

c-myc

GCN gevinst var signifikant associeret med dårlig prognose ved univariate (

P

= 0,034) og multivariat (

P

= 0,040) analyser.

c-MYC

proteinoverekspression blev observeret i 201 (54,8%) ud af 367 patienter og svagt korreleret med

c-MYC

GCN gevinst (ρ, 0,211). I kohorte 2,

c-myc

genetiske status var heterogen i avanceret CRC patienter. Uoverensstemmelse mellem GCN gevinst i den primære tumor og enten fjernt eller lymfe-knude metastaser var 25,7% og 30,4%, hhv. En tilsvarende frekvens for

c-myc

GCN forstærkning og forstærkning blev observeret i CRC patienter med både vildtype og muterede

KRAS

.

Konklusioner

c-myc

GCN gevinst var en uafhængig faktor for dårlig prognose i træk CRC patienter og i den fase II-III undergruppe. Vores resultater viser, at status af

c-myc kan

være nyttige til at forudsige patienternes resultat og til styring af CRC patienter

Henvisning:. Lee KS, Kwak Y, Nam KH, Kim DW , Kang SB, Choe G, et al. (2015)

c-myc

Copy-nummer Gain er en uafhængig Prognostisk faktor i patienter med kolorektal cancer. PLoS ONE 10 (10): e0139727. doi: 10,1371 /journal.pone.0139727

Redaktør: Andreas Krieg, Heinrich-Heine-Universitet og Universitetshospital Duesseldorf, TYSKLAND

Modtaget: 24. maj 2015; Accepteret: September 15, 2015; Udgivet: 1 okt 2015

Copyright: © 2015 Lee et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

Finansiering: Denne forskning blev støttet af en bevilling på Korea Health Technology R D Project via Korea Health Industry Development Institute (KHIDI), finansieret af Ministeriet for. Sundhed Velfærd, Republikken Korea (tilskud nummer: HI14C1813, https://www.khidi.or.kr/eps). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

c-myc

proto-onkogen koder en transskription faktor, der spiller en central rolle i celledeling, differentiering, apoptose, stofskifte, og overlevelse [1, 2]. Det kan fremme tumorigenese i en række humane maligniteter [3, 4].

c-MYC

ændring sker gennem forskellige mekanismer, herunder kromosomal translokation, genamplifikation, og forstyrrelse af opstrøms signalveje [5, 6]. Gene copy-nummer (GCN) gevinst eller forstærkning er den mest almindelige

c-myc

ændring i solide tumorer [7].

Ikke desto mindre få studier har undersøgt de klinisk-patologiske konsekvenser af

c-myc

status i kolorektal cancer (CRC). Tidligere rapporter har vist, at

c-MYC

GCN gevinst i CRC er fundet hos ca. 10% af patienterne [8]. En nylig undersøgelse rapporterede, at flere væsentlige amplifikationer var fokuseret på kromosom 8, herunder 8q24 region, som indeholder

c-myc

, og foreslog, at

c-myc

var en ny markør for aggressiv sygdom i CRC [9]. Men for nylig, Christopher

et al

. indberettede data opnået ved immunhistokemi (IHC), hvilket indikerer, at c-MYC protein overekspression var signifikant associeret med forbedret prognose i CRC patienter [10]. Derfor den prognostiske værdi af

c-myc

ændringer i CRC er kontroversiel.

For nylig har vifte af muligheder for systemisk kemoterapi udvidet og målrettet terapi har været anvendt i avanceret CRC patienter, stigende patientoverlevelse [11]. Men nogle CRC patienter reagerer dårligt på målrettet terapi trods viser positive resultater i målrettede terapi-specifik mutation undersøgelser [12]. Tumor heterogenitet er en potentiel årsag til svigt af målrettet terapi og flere undersøgelser har rapporteret, at CRC besidder en heterogen genotype herunder

KRAS

,

p53

, og

BRAF

[13- 15]. Derfor brug genetisk variation mellem den primære tumor og tilsvarende metastatiske steder, som skal afklares for at forbedre forvaltningen af ​​CRC patienter med metastatisk sygdom.

heterogenitet

c-myc

og dens prognostiske implikationer har ikke systematisk undersøgt i primære CRC patienter. Formålet med denne undersøgelse var at evaluere

c-MYC

gen tilstand og dets kliniske betydning i CRC. Vi analyserede også heterogenitet

c-myc

i den primære tumor og fjernmetastaser.

Materialer og Metoder

Patienter og prøver

I alt 519 CRC patienter behandlet med radikal kirurgi ved Seoul National University Bundang Hospital blev indrulleret i denne retrospektive undersøgelse. For det første at vurdere clinicopathologic betydning af

c-myc

gen status, 367 konsekutive CRC patienter behandlet fra januar 2005 og december 2006 er tilmeldt (kohorte 1). For det andet, at undersøge uoverensstemmelse mellem de primære og metastatiske tumorer, 152 avancerede CRC patienter med synkron eller metachronous metastaser, der havde gennemgået kirurgisk resektion for primær CRC mellem maj 2003 og december 2009 blev indrulleret (kohorte 2). Alle sager blev gennemgået af to patologer (K. S. L. og H. S. L.). De klinisk-patologiske egenskaber blev indhentet fra de patienternes journaler og patologi rapporter. Opfølgning oplysninger, herunder patientens udfald og intervallet mellem datoen for kirurgisk resektion og død blev indsamlet. Data fra patienter tabte til opfølgning eller dem, der var døde af andre end CRC årsager blev censureret.

Etisk erklæring

Alle prøver blev opnået fra kirurgisk resektion tumorer undersøgt patologisk ved Patologisk Institut , Seoul National University Bundang Hospital. Alle prøver og journal data blev anonymiseret før anvendelse i denne undersøgelse, og deltagerne gav ikke skriftligt informeret samtykke. Brugen af ​​journal data og vævsprøver til denne undersøgelse blev godkendt af Institutional Review Board of Seoul National University Bundang Hospital. (Reference: B-1210 /174-301)

Tissue vifte metode

Kirurgisk resektion primære CRC prøver var formalin-fikseret og paraffin-indstøbt (FFPE). For hvert tilfælde blev repræsentative områder af donorblokkene opnåede og omstruktureret til nye modtagende blokke (Superbiochips Laboratorier, Seoul, Sydkorea) [16]. En enkelt kerne var 2 mm i diameter og sådanne indeholdende 20% tumorceller blev anset gyldige kerner.

Dual-farve sølv

situ

hybridisering

i

​​

c-myc

genet blev visualiseret ved hjælp af en blå-farvning systemet (Ultraview sølv

in situ

hybridisering [SISH] dinitrophenol [DNP] afsløring kit og c-myc DNP sonde, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA). Den centromerfusion af kromosom 8 (CEP8) blev visualiseret ved hjælp af en rød-farvning systemet (Ultraview red ISH digoxigenin [DIG] afsløring kit og kromosom 8 DIG sonde, Ventana Medical Systems). Positive signaler blev visualiseret ved 60 ganges forstørrelse og talt i 50 ikke-overlappende tumor cellekerner for hvert tilfælde (Fig 1) [17]. Små og store klynger blev scoret som 6 og 12 signaler henholdsvis

(A)

c-myc

genkopitallet gevinst (60 × forstørrelse).; (B)

c-myc

gen disomi (60 × forstørrelse).

Immunhistokemi

IHC-analyse af c-myc blev udført ved hjælp af et kommercielt tilgængeligt kanin anti-c-myc-antistof (klon Y69, katalog ab32072, Abcam, Burlingame, CA, USA). Procedurerne farvende blev udført under anvendelse af Ultraview Universal DAB kit (Ventana Medical Systems) og en automatiseret farvningsværktøjet (BenchMark®XT, Ventana Medical Systems) i overensstemmelse med producentens anvisninger. Nuklear immunfarvning af c-myc var negativ i normal slimhinde. Til statistisk analyse blev c-myc nukleare farvning af enhver intensitet i mere end 10% af neoplastiske celler scoret som positive (S2 Fig) [10].

mikrosatelitter ustabilitet

mikrosatelitter ustabilitet (MSI ) blev vurderet i CRC tilfælde med tilgængelige væv. MSI resultater blev genereret ved at sammenligne de allelle profiler af 5 mikrosatellitmarkører (BAT-26, BAT-25, D5S346, D17S250, og S2S123) i tumoren og den tilsvarende normale prøver. Polymerasekædereaktion (PCR) produkter fra FFPE væv blev analyseret under anvendelse af et automatiseret DNA-sekventeringsapparat (ABI 3731 Genetic Analyser, Applied Bio systemer, Foster City, CA, USA) ifølge protokollen beskrevet tidligere [18].

KRAS

mutation analyse

KRAS

mutation detektion blev opnået ved at smelte kurve analyse ved hjælp af cobas 4800 System (Roche, Branchburg, NJ, USA) med automatiseret resultat tolkning software . Dette er en TaqMelt-baseret real-time PCR-analyse udformet til at detektere tilstedeværelsen af ​​21

KRAS

mutationer i kodon 12, 13 og 61. arbejdsgang og testprocessen er tidligere blevet beskrevet [19].

statistiske analyser

associering mellem de klinisk-patologiske træk og

c-myc

status blev analyseret ved hjælp af chi-square eller Fishers eksakte test, som er relevant. Korrelationen mellem påvisningsmetoder blev undersøgt under anvendelse af Pearson korrelationskoefficienten. Patienternes overlevelse blev analyseret ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden og log-rank testen blev anvendt til at bestemme, om der var nogen signifikante forskelle mellem overlevelseskurverne. Univariate og multivariate regressionsanalyse blev udført ved hjælp af Cox ‘proportionale farer model til at bestemme hazard ratio og 95% konfidensintervaller for hver faktor. En

P-

værdi 0.05 blev accepteret som statistisk signifikant. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS statistik 21 software (IBM, Armonk, NY, USA).

Resultater

c-myc

gen status og kliniske implikationer for træk primære CRC patienter

i hinanden følgende primære CRC sager (kohorte 1), medianen

c-myc

: CEP8 forholdet var 1,29 (interval, 0,58-5,17).

c-myc

genamplifikation, defineret ved en

c-myc

: CEP8 forholdet ≥ 2,0 og svarer til den, der er fastsat for

HER2

[20], blev påvist i 31 (8,4%) af 367 patienter. Den gennemsnitlige

c-myc

GCN var 2,88 (interval, 1,22-13,12). I den foreliggende undersøgelse, vi definerede GCN gevinst som ≥ 4,0

c-myc

kopier /kerne [21], og det blev påvist i 63 (17,2%) af 367 CRC patienter. Alle

c-myc

forstærkning blev medtaget i

c-myc

GCN gevinst. En

c-myc

GCN vinde ≥ 4 havde den laveste

P

-værdi (

P

= 0,015) og dermed blev observeret til at være den mest prædiktive cut-off punkt for patienten prognose (figur 2); ≥ 5,0

c-myc

kopier /kerne også påvirket patient prognose (

P

= 0,026). Der var ingen signifikant sammenhæng mellem patientens prognose og enten

c-myc

forstærkning (

P

= 0,149) eller 2, ≥ 3, og ≥ 6

c-myc

kopier /kerne (

P

= 0,752,

P

= 0,175, og

P

= 0,122, henholdsvis)

(A)

c-myc

genkopitallet (GCN) vinde.; (B)

c-myc

GCN gevinst i den fase II-III undergruppe; (C)

c-myc

forstærkning.

Tabel 1 viser forholdet mellem

c-myc

status og de klinisk-patologiske parametre i træk primære CRC’er (kohorte 1 ). Forstærkning af

c-myc

korreleret med tidlig-stadie sygdom (

P

= 0,039).

c-myc

GCN gevinst blev hyppigt observeret i sigmoid tyktarm og endetarm tumorer (

P

= 0,034), små tumorer (

P

= 0,041), og dem, der er klassificeret som mikrosatellit stabil eller MSI-lav (

P

= 0,029).

Prognostisk betydning af

c-myc

gen status i CRC patienter

Alle CRC patienter lykkedes fulgt op til optagelse i overlevelse analyse (figur 2). I kohorte 1, den gennemsnitlige opfølgningsperiode var 55 måneder (interval, 1-85 måneder) og 101 (27,5%) patienter døde under opfølgningsperioden. Kaplan-Meier analyse viste, at

c-myc

GCN gevinst var signifikant forbundet med dårlig overlevelse i CRC patienter (

P

= 0,015), men

c-myc

forstærkning var ikke (

P

= 0,149). I fase II-III undergruppe,

c-myc

-GCN gevinst forudsagde også dårlig prognose (

P

= 0,034). Multivariat analyse af

c-myc

status er opsummeret i tabel 2, og viste, at

c-myc

-GCN vinde uafhængigt forudsagt dårlig prognose i træk kohorte (

P

. 0,001) og i undergruppen af ​​patienter med stadie II-III CRC (

P

= 0,040)

Sammenhæng mellem

c-myc

GCN gevinst og protein overekspression

overekspression af c-myc protein blev påvist i 201 (54,8%) af 367 CRC patienter (kohorte 1) og var forbundet med tidlig pT stadium (

P

0,001 ), lav kvalitet af histologisk differentiering (

P

= 0,007), fravær af perineurale invasion (

P

= 0,025) og mindre størrelse (

P

0,001) ( tabel 1). Overekspression af c-myc-proteinet var associeret med GCN gevinst (ρ, 0,211;

P

0,001), som blev kategoriseret som svagt korrelation ifølge dancey og Reidy kategorisering (2004) [22]. Desuden kun 46 (22,9%) af 201 patienter med c-myc overekspression viste en GCN gevinst.

c-myc

status og heterogenitet i henhold til tumor placering i avanceret CRC patienter

for at vurdere den regionale heterogenitet

c-myc

status, vi undersøgte væv fra 3 steder, herunder den primære cancer, fjernmetastaser, og lymfe-node metastase for hver patient med fremskreden CRC (kohorte 2). I de primære tumorer i kohorte 2, medianen

c-myc

: CEP8 forholdet var 1,14 (interval, 0,57-2,97).

c-MYC

genamplifikation blev påvist i 8 (5,3%) af 152 patienter. Den gennemsnitlige

c-myc

GCN var 2,97 (interval, 1,40-9,94).

c-myc

GCN gevinst blev påvist i 48 (31,6%) af 152 CRC patienter. Desuden

c-MYC

GCN forstærkning blev fundet i 33 (21,7%) patienter med fjerne metastatiske tumorer. Lymfeknuder-node metastaser blev observeret i 79 ud af 152 avancerede CRC patienterne og

c-myc

GCN gevinst blev observeret i 18 (22,8%) af disse sager. Den heterogenitet

c-myc

GCN gevinst efter tumor placering er vist i tabel 3. Af 152 sager, uoverensstemmelse mellem

c-myc

GCN gevinst i den primære tumor og fjernmetastaser blev bemærket i 39 (25,7%) tilfælde. Uoverensstemmelse mellem

c-myc

GCN gevinst i den primære tumor og lymfe-knude metastaser blev fundet i 24/79 (30,4%) tilfælde. Således regional heterogenitet

c-myc

GCN gevinst var ganske almindeligt i avanceret CRC.

c-myc

GCN heterogenitet blev ikke korreleret med klinisk-patologiske faktorer og prognose (

P

0,05; data ikke vist)

Der var ingen statistisk signifikant. sammenhæng mellem de klinisk-patologiske faktorer og

c-myc

GCN gevinst i primær, fjernt metastatisk, og lymfeknuder-node metastatiske tumorer fra kohorte 2 CRC patienter (

P

0,05; data ikke vist) . Den gennemsnitlige follow-up tid var 42 måneder (interval, 1-105 måneder) og 67 patienter (44,1%) døde af kræft i løbet af opfølgningsperioden. Kaplan-Meier-analyse viste, at patienter med

c-MYC

GCN gevinst i den primære tumor var dårligt resultat end dem uden, men dette resultat var ikke statistisk signifikant (

P

= 0,499). Men ≥ 3,0

c-myc

kopier /kerne i den primære tumor var signifikant associeret med en dårlig prognose (

P

= 0,044; S1 Fig). Der var ingen signifikant sammenhæng mellem patienternes prognose og

c-myc

GCN gevinst i fjerne eller lymfe-node metastaser (

P

= 0,981 og

P

= 0,417, henholdsvis; data ikke vist)

KRAS

mutationer i avanceret CRC

cobas

KRAS

test blev udført på 152 primære tumorer fra avancerede CRC sager. (kohorte 2).

KRAS

genmutationer blev observeret i 84 (55,3%) tilfælde og var forbundet med tumorer placeret i den rigtige kolon (

P

= 0,019), men var ikke korreleret med andre klinisk-patologiske faktorer (

P

0,05; data ikke vist). Derudover var der ingen statistisk forskel mellem overlevelse CRC patienter med muteret eller vildtype

KRAS Hotel (

P

= 0,688; data ikke vist). Af 68 tilfælde med vildtype

KRAS

,

c-myc

forstærkning blev bemærket i 4 (5,9%) og en

c-myc

GCN gevinst i 28 (41,2 %). Af 84 tilfælde med muteret

KRAS

, 4 viste

c-myc

forstærkning (4,8%) og 20 (23,8%) afslørede en

c-myc

GCN gevinst.

c-myc

GCN ændringer forekom hos patienter med både vildtype og muteret KRAS. Derfor

c-myc

GCN ændringer og

KRAS

mutationer var ikke udelukker hinanden.

Diskussion

Selv om der har været flere rapporter om

c-myc

status i humane kræftformer, er der ingen etablerede kriterier for GCN gevinst. Cancere med et

c-MYC

GCN forstærkning er ofte forbundet med en dårlig prognose. En tidligere undersøgelse af mucinøs gastrisk karcinom viste, at

c-myc

forstærkning, defineret som en

c-myc

: CEP8 forholdet 2.0, var stærkt korreleret med fremskredne stadier af kræft [23]. En anden rapport fundet en sammenhæng mellem

c-myc

forstærkning ( 4 kopier /celle i mindst 10% af tumorcellerne) og fremskredne stadier af ovariecancer [21]. I en undersøgelse af prostatakræft,

c-myc

GCN gevinst omfattede kriteriet om en

c-MYC /

CEP8 forholdet 1.5, og en dårlig prognose blev observeret for patienter i denne kategori [24]. I den nyeste forskning på adenokarcinom i lunge, patienter med 2

c-myc

kopier /kerne blev klassificeret som havende en øget

c-myc

GCN, som viste sig at være en uafhængig dårlig prognostisk faktor [25]. I CRC patienter, blev det rapporteret, at

c-myc

forstærkning, defineret som en

c-MYC /

CEP8 forholdet 2, blev ofte påvises ved hjælp fluorescerende

in situ

hybridisering (9,0-14,2%), men var relateret til kliniske resultat og patologiske data [26]. Derfor har vi anvendt forskellige kriterier til at bestemme

c-myc

forstærkning eller GCN gevinst i denne undersøgelse, og har defineret

c-myc

GCN gevinst som ≥ 4 kopier /kerne, fordi det havde den laveste

P

-værdi for sygdom prognose (figur 2). I kohorte 1, den store træk kohorte, CRC patienter med

c-myc

GCN gevinst havde en dårlig overlevelse end dem uden (

P

= 0,015). Desuden i multivariat analyse,

c-myc

, GCN gevinst var en signifikant CRC prognostisk faktor, både i den fortløbende kohorte og for dem med trin II-III-sygdom. Den prædiktive værdi af

c-myc

GCN fandtes at være uafhængig af kendte prognostiske faktorer.

c-myc

GCN gain kriterier, der anvendes i den foreliggende undersøgelse, sammen med SISH metoden, kan være nyttige ved vurderingen CRC patienter, fordi det klart identificerede patienter forventes at have ringe overlevelse, uanset

c Myc

:. CEP8 forholdet

i kohorte 2 viste vi, at der var

c-myc

GCN regional heterogenitet mellem den primære websted og dets relaterede metastaser. En

c-myc

GCN gevinst (c-myc GCN ≥ 4,0) i den primære kræft var ikke signifikant associeret med dårlig overlevelse (

P

= 0,499; S1 Fig), hvilket kan skyldes alle kohorte 2 bestod af avancerede CRC patienter med synkron og metachronous metastase og kohorte 2 blev stort set består af trin IV CRC (98 sager, 64,5%). De modtog en række personlig behandling henholdsvis og disse kan afspejle den statistiske ubetydelighed. Interessant, vi anvendt lidt ikke-restriktive kriterier for GCN gevinst (

c-myc

GCN ≥ 3,0) og dens prognose blev ændret til statistisk signifikant (

P

= 0,044; S1 Fig). I bred forstand, c-

MYC

GCN gevinst på primær kræft tendens til at korreleret med dårlig overlevelse i avanceret CRC. På den anden side,

c-myc

status i fjern og lymfe-knude metastatisk læsion var ikke relateret til patientens prognose, selvom vi prøvede alle mulige GCN kriterier. Selvom,

c-myc

heterogenitet blev observeret hyppigt i avanceret CRC, en

c-myc

GCN gevinst i den primære cancer blev ofte forbundet med dårlig overlevelse. Derfor er

c-myc

GCN i den ikke-metastatisk læsion bør anvendes ved evaluering prognose.

I en tidligere undersøgelse, overekspression af

c-myc

mRNA i CRC blev fundet at være forbundet med en bedre prognose [27], men dette resultat blev modsagt af en anden undersøgelse [28]. Christopher

et al

. nylig vist, at c-myc-overekspression bestemmes ved IHC alene, var signifikant associeret med en bedre overlevelse i CRC patienter, når vurderet ved univariat analyse, men ikke af multivariat analyse [10]. Interessant nok fandt vi modstridende resultater i en tidligere c-MYC overekspression undersøgelse; formentlig, fordi c-myc-ekspression styres af et komplekst regulatorisk pathway involverer flere vekselvirkninger med andre molekyler, snarere end simpel GCN gain [29]. Desuden fandt vi en svag sammenhæng mellem c-MYC protein overekspression og GCN gevinst i CRC patienter.

c-myc

GCN gevinst blev ikke observeret i de fleste c-myc protein overekspression sager. I modsætning til den

c-myc

GCN gevinst, overekspression af c-myc protein blev korreleret med mindre aggressive træk (tabel 1). Disse resultater tyder på, at

c-myc

GCN gevinst er sandsynligvis kun delvist ansvarlig for protein overekspression. Som overekspression af c-myc er ikke det samme som en

c-myc

GCN gevinst, er der behov for yderligere forskning for at forklare forskellen på c-myc overekspression og GCN gevinst i CRC tumorigenese.

Mutationer i

KRAS

er tydelige i 30-40% af kolorektale tumorer [30-32]. Faktisk rapporterede tidligere undersøgelser, at en

KRAS

mutation blev associeret med resistens mod anti-epidermal vækstfaktor receptor (EGFR) monoklonalt terapi og en ringe overlevelse [33-35]. I vores undersøgelse,

KRAS

mutationer var til stede i 55,3% af avancerede CRC patienter (kohorte 2) og var ikke forbundet med prognosen. Det kan være, fordi vi undersøgte

KRAS

mutation status i avancerede CRC patienter. Phipps et al. også rapporteret, at

KRAS

-mutation status blev ikke forbundet med dårlig sygdomsspecifikke overlevelse i tilfælde, der præsenteres med fjern-trins CRC [33].

c-myc

forstærkning blev observeret i 5,9% af vildtype

KRAS

og 4,8% af muterede

KRAS

CRCs. En

c-myc

GCN gevinst blev observeret i 41,2% af vildtype

KRAS

og 23,8% af muterede

KRAS

CRCs. Det er bemærkelsesværdigt, at disse 2 genetiske begivenheder, som ikke udelukker hinanden. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at undersøge muligheden for at bruge

c-myc

genetiske ændringer som terapeutiske mål i avancerede CRC patienter med primær og sekundær resistens over for anti-EGFR behandlinger.

Sammenfattende vi omfattende analyserede

c-myc

gen status CRC patienter ved hjælp SISH.

c-myc

GCN forstærkning og forstærkning blev observeret i 17,2% og 8,4% af konsekutive CRC patienter.

c-myc

GCN gevinst var en uafhængig dårlig prognostisk faktor, både i den fortløbende kohorte og i undergruppen af ​​patienter med stadie II-III-sygdom. Disse resultater viser, at

c-myc

status kan bruges til at forudsige prognosen for CRC patienter, og kan informere kommende undersøgelser af de patogenese og mekanismer involveret i udviklingen af ​​CRC.

Støtte Information

S1 fig. Kaplan-Meier overlevelseskurver illustrerer prognostiske effekt af

c-myc

status i primære læsioner af kolorektal cancer (kohorte 2).

(A)

c-myc

genkopital ( GCN) ≥ 3,0; (B)

c-myc

GCN ≥ 4,0

doi:. 10,1371 /journal.pone.0139727.s001

(TIF)

S2 Fig. Repræsentative tal for c-myc overekspression ved immunhistokemi (A og B) i kolorektal cancer patienter Hotel (A) c-myc overekspression (40 × forstørrelse).; (B) nr c-myc-ekspression (40 × forstørrelse);

doi: 10,1371 /journal.pone.0139727.s002

(TIF)

Tak

Forfatterne takker Superbiochips Laboratorier for fremragende teknisk bistand.