PLoS ONE: Målretning NF-KB Pathway som kombinationsbehandling for Advanced kræft i skjoldbruskkirtlen

abstrakt

NF-KB-signalering spiller en vigtig rolle i tumorcelleproliferation, celleoverlevelse, angiogenese, invasion, metastase og lægemiddel /stråling modstand. Kombinationsterapi involverer NF-KB-vejen inhibering er en attraktiv strategi til behandling af avancerede former for kræft i skjoldbruskkirtlen. Denne undersøgelse blev designet til at teste effektiviteten af ​​NF-KB-pathway hæmning i kombination med cytotoksisk kemoterapi, ved hjælp af docetaxel og ioniserende stråling i

in vitro

modeller af kræft i skjoldbruskkirtlen. Vi fandt, at mens både docetaxel og ioniserende stråling aktiveret NF-KB signalering i skjoldbruskkirtlen cancerceller, var der ingen synergistisk virkning på celleproliferation og /eller programmeret celledød med enten genetisk (transduktion af en dominant negativ mutant form af kBa) eller farmakologisk ( proteasominhibitoren bortezomib og IKKβ inhibitor GO-Y030) hæmning af NF-KB-vejen i kræft i skjoldbruskkirtlen cellelinjer BCPAP, 8505C, THJ16T og SW1736. Docetaxel plus bortezomib synergistisk faldt

in vitro

invasion af 8505C celler, men ikke i de andre cellelinjer. Screening af et panel af klinisk relevante målrettede behandlinger for synergi med genetisk NF-KB-hæmning i en proliferation /cytotoksicitet assay identificerede histon deacetylase (HDAC) -hæmmer suberoylanilid hydroxamsyre (SAHA) som en mulig kandidat. Imidlertid var den synergistiske virkning bekræftes kun i BCPAP celler. Disse resultater viser, at NF-KB-inhibitorer er usandsynligt, at være gavnlig som kombinationsbehandling med taxan cytotoksisk kemoterapi, ekstern strålebehandling eller radioaktivt iod terapi. Der kan være enkeltstående omstændigheder, hvor NF-KB-inhibitorer kan overvejes i kombination med docetaxel til at reducere tumorinvasion eller i kombination med HDAC-inhibitorer til at reducere tumorvækst, men dette synes ikke at være en kombinationsterapi, der kunne finde bred anvendelse til patienter med fremskreden kræft i skjoldbruskkirtlen. Yderligere forskning kan identificere, hvilke delmængder af patienter /tumorer kan reagere på denne terapeutiske tilgang

Henvisning:. Pozdeyev N, Berlinberg A, Zhou Q, Wuensch K, Shibata H, Wood WM, et al. (2015) Målretning NF-KB Pathway som kombinationsbehandling for Advanced kræft i skjoldbruskkirtlen. PLoS ONE 10 (8): e0134901. doi: 10,1371 /journal.pone.0134901

Redaktør: Jacques Emile Dumont, Université Libre de Bruxelles (ULB), BELGIEN

Modtaget: Juli 6, 2015; Accepteret: 10. juli 2015; Udgivet: 11 August, 2015

Copyright: © 2015 Pozdeyev et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden papiret

Finansiering:. Dette arbejde blev finansieret af NIH /NCI forskningsbevilling R01 CA100560 (www.nih.gov) til BRH ved Mary Rossick Kern og Jerome H. Kern Endowment for Endocrine Neoplasmer Research til BRH, og ved en Endocrine Fellow Foundation forskningsbevilling (www.endocrinefellows.org) til NP. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

kræft i skjoldbruskkirtlen er et stort problem for folkesundheden med 60.000 estimerede nye tilfælde forårsager ca. 2000 dødsfald i USA i 2015 [1]. Anaplastisk thyreoideacancer (ATC) er den mest dødelige form for kræft i skjoldbruskkirtlen med en median overlevelse på 5 måneder og en 20% 1-års overlevelse på trods af en pågående behandling med en kombination af kirurgi, stråling og kemoterapi [2]. Cytotoksisk kemoterapi med docetaxel er en af ​​de få behandlinger, der viste opmuntrende resultater i ATC, især ved kombination med strålebehandling [3].

NF-KB er en familie af transkriptionsfaktorer impliceret i forskellige aspekter af tumorbiologi såsom celleproliferation, overlevelse, angiogenese, invasion, metastase og medikamentresistens [4]. NF-KB-signalering blev fundet at være konstitutivt aktiveret i hepatocellulært carcinom [5], colorectal cancer [6], brystcancer [7], prostatacancer [8] og andre faste og hæmatologiske maligniteter [4]. Anti-cancer medicin og ioniserende stråling opregulere NF-KB-vej, der resulterer i udvikling af behandlingen resistens [9,10]. Dette førte til en betydelig indsats for at udvikle NF-KB-hæmmere og undersøgelse af deres effektivitet til behandling af kræft både i prækliniske modeller og i kliniske forsøg [4,11].

Som det er blevet vist for andre tumorer, kræft i skjoldbruskkirtlen væv har forøget ekspression af NF-KB transkriptionsfaktorer, der er forbundet med et større tumorstørrelse, tilstedeværelse af nodal metastaser, ekstrathyreoideale udvidelse og

BRAF V600E

mutation [12-15]. Rollen af ​​NF-KB signalering i skjoldbruskkirtlen cancercellevækst, migration, invasion og angiogenese er blevet vist [16-18]. En synergistisk virkning af docetaxel og NF-KB inhibitor curcumin på celleproliferation og apoptose i ATC cellelinien 8505C er blevet rapporteret [19]. Kombinationen af ​​I

131 og NF-KB-inhibering med enten en IKB kinase (IKK) inhibitor Bay 11-7082 eller p65 siRNA resulterede i et større fald i vækst thyreoideacancer

in vitro

[20] og i en flanke xenograft model i mus [21] end både terapi alene. Opmuntret af disse resultater, vi designet denne undersøgelse havde til formål at systematisk undersøge fordelene ved kombinationsbehandling med enten docetaxel eller ioniserende stråling, og NF-KB-pathway hæmning hjælp

in vitro

modeller af kræft i skjoldbruskkirtlen.

Metoder

cellelinjer og genetiske konstruktioner

Denne undersøgelse blev udført ved hjælp af en papillær kræft i skjoldbruskkirtlen (PTC) cellelinje BCPAP og tre ATC cellelinjer 8505C, THJ16T og SW1736 der er blevet valideret ved kort tandem gentag profilering [22,23]. Cellelinier blev manipuleret til at udtrykke den dominante negative mutant form af kBa (mIκBα), der er resistent over for proteasomalaktivitet nedbrydning [24]. Ophobning af langt overskydende cytoplasmatisk mIκBα forhindrer nukleare translokation af NF-KB transkriptionsfaktorer lukke ned kanoniske NF-KB-signalering. Frembringelse af pQCXIP-mIκBα konstrukt, transduktion og antibiotisk selektion er beskrevet nærmere andetsteds [17]. Fænotypen af ​​hver cellelinje blev testet ved at måle ophobningen af ​​kBa protein ved western blot og funktionelt ved at estimere NF-KB transkriptionsfaktor p65 binding til KB-DNA-konsensus sites (Transam NFKB p65 ELISA-kit, aktive motiv). Tumornekrosefaktor α (TNFa) blev anvendt som en positiv kontrol for NF-KB signaleringsaktivering. Vi viste, at mIκBα transduktion fører til kBa ophobning og hæmning af både baseline og TNFa-stimulerede p65 DNA binding i BCPAP celler (figur 1) og andre thyreoideacancer cellelinier (data ikke vist).

Data er normaliseret køretøjet behandlede vektor gruppe. * -p 0,01 for effekten af ​​TNF i vektoren gruppen (tovejs ANOVA efterfulgt af Bonferroni posttest)

For at bekvemt overvåge NF-KB-pathway aktivitet vi konstrueret en lentiviral vektor indeholdende et

Renilla

luciferase reporter drevet af en minimal

c-fos Salg promotor under regulering af fire opstrøms NF-KB responselementer (KB). Denne vektor blev transduceret ind BCPAP og 8505C thyreoideacancerceller allerede udtrykker

Firefly

luciferase drevet af en konstitutiv CMV-promotor som en ikke-NF-KB-regulerede kontrol. Efter transduktion og antibiotisk udvælgelse med puromycin blev cellerne vurderet for ekspression af begge

Firefly

Renilla

luciferaseaktivitet (fig 2, Dual-Luciferase Reporter Assay System, Promega).

proteasominhibitor bortezomib og IKK-komplekset inhibitor GO-Y030 modvirke NF-KB-aktivering af docetaxel. Celler blev inkuberet med lægemidler i 48 timer forud for reporter luciferaseaktivitet målinger. Forskellene mellem grupperne er meget signifikant (p 0,0001, envejs ANOVA). Stjerner angiver signifikant ændring (p 0,05, Newman-Keuls posttest) sammenlignet med den tilsvarende kontrolgruppe (TNFa, docetaxel alene og bortezomib alene blev sammenlignet med køretøjets docetaxel og bortezomib /GO-Y030 kombinationer blev sammenlignet med docetaxel eneste gruppe) .

Narkotika og strålebehandlinger

De fleste farmakologiske midler blev opnået i pulverform fra LC Labs og Sellekchem, og som rekonstitueres i DMSO. Slutkoncentrationen af ​​DMSO i dyrkningsmedierne oversteg ikke 0,05%. Den proteasomalaktivitet inhibitor bortezomib, en FDA godkendt stof, der blokerer NF-KB-pathway ved at hæmme kBa proteolyse [25], blev brugt til at studere lægemiddelinteraktion synergi. En eksperimentel IKKβ inhibitor GO-Y030 [26] tjente som en alternativ farmakologisk NF-KB-signalering inhibitor og blev opnået fra Dr. Shibata laboratorium (Akita, Japan).

X-ray ioniserende stråling blev leveret i en dosis af 2 og 5 Gy af en RS2000 røntgen bestråler (Rad Source Technologies).

Cell cytotoksicitet /spredning /levedygtighed analyser

virkningerne af lægemidler, ioniserende stråling og genetisk modifikation på tumorceller overlevelse og proliferation blev målt ved 72 timer sulforhodamin B-assay (SRB) [27] samt ved direkte tælling af antallet af levedygtige celler under anvendelse af en Vi-CELL XR cellelevedygtighed Analyzer (Beckman Coulter).

In vitro

invasion assay

Thyroid cancerceller blev podet ved en densitet på 5×10

6 celler pr plade og dyrket i RPMI-1640 medium suppleret med 5% FBS i 6 timer. Medier blev derefter aspireret og erstattet med medium suppleret med 0,1% FBS, og cellerne blev inkuberet i 18 timer. Celler blev høstet og 1×10

6-celler blev podet i de øvre kamre i Matrigelcoatede transwell kamre (24 brønde, 8 um porestørrelse, BD Biosciences) i RPMI-1640 med 0,1% FBS. Assays blev udført in duplo. Celler invaderet i det nederste kammer indeholdende medier med 10% FBS. Efter 18 timer ikke-invaderende celler i det øverste kammer blev kasseret, og invaderende celler blev fikseret med methanol, farvet med 3 ug /ml 4 ‘, 6-diamidino-2-phenylindol (DAPI; Invitrogen) og talt i fem mikroskopiske felter under 10x forstørrelse med anvendelse Metamorph software (Molecular Devices).

Screening af klinisk relevante målrettede lægemidler til synergi med NF-KB-pathway hæmning

spredning af celler, der udtrykker mIκBα (som en genetisk model af NF -κB pathway inhibering, vist sig at frembringe en yderst effektiv fænotype (fig 1)) blev vurderet ved SRB-assays. Tre thyreoidea cancer cellelinjer blev udsat for en række af cytotoksisk og målrettede behandlinger. Af de 15 målrettede behandlinger, der anvendes til screening, var 12 kinaseinhibitorer, DAPT er en γ-sekretase hæmmer, decitabin er en DNA methyltrasferase inhibitor og suberoylanilid hydroxamsyre (SAHA, vorinostat) inhiberer histondeacetylaser. Otte point dosis-respons-kurver blev opnået og halvmaksimal inhiberende lægemiddel koncentration (IC

50) blev beregnet ved tilpasning af de eksperimentelle data ved hjælp 4-parameter logistisk ikke-lineær regression ved hjælp af et skræddersyet R script. Hits blev identificeret ved sammenligning IC

50 for kontrol vektor og mIκBα transducerede celler og blev yderligere evalueret under anvendelse af SRB-assayet og levedygtige celler tælling.

Caspase-3/7 assay

Celler blev podet i 96-brønds plader i to eksemplarer til en densitet på 7.5×10

4 celler /brønd i RPMI-1640 medium suppleret med 5% føtalt bovint serum (FBS). Følgende inkubation natten over lægemidler blev tilsat enten alene eller i kombination i 24 timer og FBS i medierne blev ændret til 0,1%. Caspase-3/7 aktivitet blev vurderet ved hjælp af en luminescens-baserede caspase assay ifølge producentens instruktioner (Caspase GloTM 3/7 Indhold, GloMax Multimode Reader, Promega).

Statistiske og synergi beregninger

statistiske beregninger blev udført under anvendelse af GraphPad Prism. Den specifikke analyse anvendte metode og de beregnede p-værdier er beskrevet i en tilsvarende tal legende. Data er udtrykt som middelværdi ± standardafvigelse.

Bliss uafhængighed indeks (BI) og kombinationen (CI) blev beregnet som et mål for den synergistiske virkning. En BI og CI 0,8 blev accepteret som et bevis for synergi. BI blev beregnet ud fra følgende formel: BI = ((F

a + F

b) – (F

en * F

b)) /F

ab, hvor F

a er virkningen af ​​et lægemiddel eller strålebehandling; F

b er virkningen af ​​en farmakologisk NF-KB inhibitor eller mIκBα; (F

a + F

b) – (F

en * F

b) er den forudsagte summen af ​​virkningerne af to behandlinger; F

ab er den faktiske virkning af en kombinationsbehandling fundet eksperimentelt

Drug /narkotika synergi blev også evalueret af Chou kombination index (CI) [28] ved hjælp Compusyn software (http:. //Www. combosyn.com). Til disse beregninger konstrueret vi 8-punkts dosis-respons-kurver for enkelt lægemiddel og narkotika kombination. CI for IC er rapporteret

50.

Resultater

Docetaxel og ioniserende stråling aktivere NF-KB-vejen i skjoldbruskkirtlen cancerceller

Brug BCPAP og 8505C celler manipuleret til at udtrykke

Renilla

luciferase NF-KB-aktivitet reporter som en udlæsning af NF-KB-aktivitet, både positiv kontrol 25 ng /ml TNFa og 5 nM docetaxel i 48 timer steg NF-KB reporter-aktivitet (figur 2). Effekten af ​​docetaxel var større i BCPAP celler (fig 2A og 2B). Farmakologisk NF-KB-signalvejshæmmere var effektive til ophævelse af docetaxel-inducerede stigning i reporter-aktivitet ved koncentrationer på ≥ 5 nM og ≥ 250 nm for bortezomib (Fig 2A og 2C) og GO-Y030 (Fig 2B og 2D) hhv.

En tidsforløbet for virkningen af ​​ioniserende stråling på NF-KB-aktivitet luciferase reporter i BCPAP og 8505C-celler er vist i fig 3A og 3B. Svarende til docetaxel blev NF-KB-vejen aktiveres efter ≥ 48 h udsættelse for ioniserende stråling. Dette resultat blev bekræftet under anvendelse af et funktionelt assay, der målte p65-binding til DNA-segmenter, der indeholder NF-KB-sekvenser i BCPAP celler (Fig 3C). I mIκBα overekspression celler, blev både baseline og stråling-induceret NF-KB-signalering blokeret.

p65 DNA binding blev udført 72 timer efter stråling. Data er normaliseret ikke bestrålet gruppe (på et tidspunkt 0 timer til paneler A og B). * -p. 0,05, (to-vejs ANOVA, Bonferroni posttest)

Mangel på en synergistisk effekt af docetaxel eller ioniserende stråling og farmakologiske eller genetisk NF-KB-vejen hæmning på skjoldbruskkirtlen cancerceller proliferation /død

den næste serie af eksperimenter testede den hypotese, at virkningen af ​​klinisk relevante behandlinger såsom docetaxel og ioniserende stråling vides at aktivere NF-KB-signalering forstærkes af farmakologisk (bortezomib og GO-Y030) eller genetisk (mIκBα ) NF-KB-signalering inhibering. Ingen synergi blev fundet uanset den anvendte synergi beregningsmetode cytotoksicitet /cellelevedygtighed assay eller thyroidcancer cellelinje (tabel 1). Ligeledes blev der ikke synergi fundet, når ioniserende stråling ved 2 og 5 Gy doser blev kombineret med NF-KB-blokade af mIκBα i 48 eller 72 timer i BCPAP og SW1736 celler (tabel 2).

Docetaxel aktiverer ikke caspase-3/7 i skjoldbruskkirtlen kræftceller

NF-KB-signalering hæmning sensibiliserer celler til apoptose induceret af cytokiner, såsom TNF [24]. Det er blevet rapporteret, at docetaxel inducerer også apoptose i skjoldbruskkirtlen cancerceller [29], men det mislykkedes at vise synergi med NF-KB-pathway hæmning i vores eksperimenter. Idet denne forskel i betragtning besluttede vi at vurdere, om docetaxel inducerer apoptose i vores modeller. I modsætning til offentliggjorte data, docetaxel, og samtidig være yderst effektive i SRB-assayet (IC

50 i picomolær området, data ikke vist), inducerede ikke caspase-3/7-aktivitet i BCPAP og 8505C-celler (Fig 4). Bortezomib, anvendt som en positiv kontrol, dosisafhængig aktiveret caspase-3/7 disse cellelinier

Stjerner peger på en statistisk signifikans sammenlignet med en laveste dosis (p. 0,05, envejs ANOVA, Newman-Keuls posttest).

effekten af ​​docetaxel og bortezomib på kræft i skjoldbruskkirtlen celleinvasion

in vitro

effekten af ​​en docetaxel /bortezomib kombination på en mere komplekse aspekt af tumorbiologi, matrix invasion, blev testet (figur 5). Det stof kombination synergistisk hæmmet 8505C kræft i skjoldbruskkirtlen celleinvasion

in vitro

(BI på 0,47 tyder på en moderat grad af synergi), men havde ingen effekt på invasion af THJ16T celler. En tendens mod reduceret invasion i BCPAP celler efter behandling med docetaxel /bortezomib kombination var ikke signifikant Salg

Stjerner angiver en signifikant virkning af kombinationen lægemiddel (p. 0,05, gentagne målinger envejs ANOVA, Newman-Keuls posttest ). Effekten af ​​lægemidler på invasionen af ​​BCPAP og THJ16T celler var ikke signifikant. BI-Bliss uafhængighed indeks.

Screeningen for lægemidler, som cytotoksiske /anti-proliferativ effekt på skjoldbruskkirtlen kræftceller forstærkes af NF-KB-pathway hæmning med mIκBα

Vi har udvidet vores bestræbelser på at finde lægemiddel /NF-KB-inhibering synergi ved at udføre en screening ved anvendelse af en række klinisk relevante målrettede lægemidler. mIκBα blev valgt som en “ren” metode til NF-KB-vejen inhibering, der er mindre tilbøjelige til at producere ikke-tilsigtede virkninger sammenlignet med farmakologiske NF-KB-inhibitorer. Tre cellelinjer blev manipuleret til at udtrykke mIκBα og fænotypen blev bekræftet som beskrevet i afsnittet metoder og vist på Fig 1. SRB analysen IC

50 værdier er opsummeret i Tabel 3. Fem lægemidler (cabozantinib, dabrafenib, DAPT , selumetinib og Vandetanib) var ineffektive ved maksimalt testede koncentrationer og IC

50 kunne ikke beregnes. Everolimus var den mest potent lægemiddel. Blandt de tre cellelinier, BCPAP var mere følsomme og 8505C mere modstandsdygtige samlet og dette korreleret med hastigheden af ​​proliferation (data nu vist). SAHA var den eneste forbindelse, der konsekvent udviste synergi i kombination med mIκBα og blev yderligere undersøgt.

potensering af SAHA cytotoksisk /anti-proliferative effekt af mIκBα blev bekræftet i en 12-koncentration SRB assay i BCPAP celler, men ikke i 8505C eller THJ16T celler (Fig 6). Synergien blev også demonstreret ved direkte tælling af levedygtige celler efter 3 dages eksponering til 500 nM SAHA (BI = 0,69 og 1,18 for BCPAP og 8505C celler, henholdsvis).

Den differentielle reaktion på SAHA i BCPAP celler var signifikant ved p. 0,0001 (tovejs ANOVA)

diskussion

i denne undersøgelse, vi søgte at afgøre, om hæmning af NF-KB-vejen synergistisk kunne hæmme skjoldbruskkirtlen kræft cellevækst hjælp

in vitro

skjoldbruskkirtlen kræftmodeller. Docetaxel og stråling aktivere NF-KB-vejen i skjoldbruskkirtlen kræftceller bekræfter tidligere observationer [19,20,29]. Men trods måling cytotoksicitet /spredning, levedygtighed samt invasion af skjoldbruskkirtlen cancerceller, ved hjælp af både farmakologiske og genetiske NF-KB-pathway hæmning og beskæftiger to algoritmer til beregning af kombinationen effekt, beviserne for synergistisk aktivitet var begrænset. Konkret blev det konstateret, at docetaxel og bortezomib synergistisk faldt

in vitro

invasion i kun 8505C celler. Ud af de 16 stoffer (herunder docetaxel og 15 andre stoffer i screeningen) kun SAHA synergistisk reduceret cellevækst når NF-KB-vejen blev blokeret, og denne virkning var begrænset til én cellelinje (BCPAP).

den tilsyneladende uoverensstemmelse mellem vores nuværende resultater og tidligere offentliggjorte undersøgelser af docetaxel [19], og jeg

131 [20,21] er sandsynligvis forklares med forskelle i den metode for oprettelse af synergistisk effekt. Ægte synergi opstår, når resultatet af kombinationsbehandlingen

overstiger Hoteller, som den

sum

af virkningerne af hver individuel behandling, og dette skal bevises kvantitativt. Til vores viden ingen af ​​de tidligere offentliggjorte undersøgelser behandlet spørgsmålet om synergi med NF-KB-signalering hæmning ved hjælp af den samme kvantitative metode som i denne undersøgelse.

Øget NF-KB-signalering i kræftceller er kendt for at blokere apoptose [ ,,,0],30]. NF-KB-vejen hæmning er blevet vist at sensibilisere cellerne til den pro-apoptotiske virkning af TNFa [24]. Vi spekulere, at den høje styrke af SAHA i synergi assayet er et resultat af den pro-apoptotiske aktivitet af histondeacetylaseinhibitorer [31]. Manglen på apoptose induktion ved docetaxel og de dårlige resultater af dette middel i denne synergi studie give yderligere dokumentation for denne hypotese. Men en detaljeret eksperimentel undersøgelse af den rolle af apoptose i lægemiddel /NF-KB-vejen hæmning synergi er uden for rammerne af denne fokuserede projekt. Saha effekt potensering af NF-KB-pathway hæmning kan være af klinisk interesse. Men den entusiasme mindre af, at denne virkning blev observeret i kun ét ud af tre

in vitro

kræft i skjoldbruskkirtlen modeller (og de mekanismer, der er ansvarlige for denne selektivitet er uklare). Desuden SAHA monoterapi var ikke effektive i en fase II undersøgelse af patienter med metastatisk radioaktivt jod-refraktær thyreoideakarcinom [32].

Dette studie undersøgte flere aspekter af tumor biologi såsom celle overlevelse, spredning og invasion, der kan nemt måles

in vitro

. Det er fortsat muligt, at anti-tumor fordel af NF-KB-vejen inhibering kan være medieret af flere komplekse processer, der er vanskelige at undersøge i cellelinier, såsom angiogenese, immunrespons og andre. Også skjoldbruskkirtlen cancerceller dyrkes

in vitro

er dedifferentierede [33], og kan mangle fænotypiske egenskaber, som er vigtige for den synergistiske virkning af NF-KB signalering hæmmere.

Vi demonstrerer synergistisk effekt af docetaxel og bortezomib på kræft i skjoldbruskkirtlen celle invasion, men det var begrænset til kun én cellelinje (8505C), hvilket igen gør enhver overvejelse af denne kombinationsbehandling i fremskreden kræft i skjoldbruskkirtlen mindre tiltrækkende.

sammenfattende blev det konstateret, at kombinationsbehandling involverer NF-KB pathway hæmmere er af begrænset fordel i kræft i skjoldbruskkirtlen. Der kan være endnu uopdagede omstændigheder, hvor NF-KB-inhibitorer kan betragtes i kombination med docetaxel til at reducere tumorinvasion eller i kombination med HDAC-inhibitorer til at reducere tumorvækst, men dette synes ikke at være en kombinationsterapi, der kunne finde bred anvendelse til patienter med fremskreden kræft i skjoldbruskkirtlen. Yderligere forskning kan identificere, hvilke delmængder af patienter /tumorer kan reagere på denne terapeutiske tilgang.