PLoS ONE: Prostata Cancer modtagelighed Loci identificeret på kromosom 12 i afrikanske Americans

Abstrakt

Prostatakræft (PCA) er en kompleks sygdom, der uforholdsmæssigt påvirker afroamerikanere og andre individer af afrikansk afstamning. En række regioner i hele genomet er blevet forbundet til PCa, de fleste af dem med moderate effekter. Enkelte undersøgelser har rapporteret kromosomale ændringer på 12p og 12q, der opstår under opståen og udvikling af PCa men til dato ingen konsistent sammenhæng af sygdommen med kromosom 12 polymorf variation er blevet identificeret. For at opklare genetiske risikofaktorer, der ligger til grund for PCA sundhedsmæssige uligheder, vi undersøgte kromosom 12 ved hjælp af herkomst informative markører (mål), der tillader os at skelne genomiske regioner af europæisk eller vestafrikansk oprindelse, og testet dem for samarbejde med PSA. Yderligere SNPs blev genotype i de områder, hvor der blev påvist væsentlige signaler af foreningen. Det stærkeste signal blev opdaget ved SNP rs12827748, placeret opstrøms for

PAWR

gen, et tumor suppressor, som er rigeligt udtrykt i prostata. Den hyppigste allel i europæerne var risikoen allelen blandt afroamerikanere. Vi undersøgte også vitamin D gener,

VDR

og

CYP27B1

, og fandt en signifikant sammenhæng af PCa med TaqI polymorfi (rs731236) i det tidligere. Selvom vores resultater berettiger yderligere undersøgelser har vi afdækket en genetisk modtagelighed faktor for PCa i en sandsynlig kandidat ved hjælp af en tilgang, der drager fordel af forskellen bidrag forældrenes grupper til et blandet befolkning

Henvisning:. Bonilla C, Hooker S, Mason T, Bock CH, Kittles RA (2011) Prostata Cancer modtagelighed Loci identificeret på kromosom 12 i afroamerikanere. PLoS ONE 6 (2): e16044. doi: 10,1371 /journal.pone.0016044

Redaktør: Amanda Toland, Ohio State University Medical Center, USA

Modtaget: 13 august, 2010; Accepteret: December 6, 2010; Udgivet: 16 februar 2011

Copyright: © 2011 Bonilla et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. CB var en modtager af US Department of Defense-Congressionally Directed Medical Research Program giver no. W81XWH-06-1-0066. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Prostatakræft (PCA) er en stor sundhed byrde for befolkningen amerikanske mænd. Især er afroamerikanere uforholdsmæssigt hårdt ramt af PCa, præsentere med mere fremskreden sygdom og dårligere prognose end europæiske amerikanere [1]. Årsager til forskellene omfatter en række genetiske og miljømæssige faktorer som race, alder, familie historie, socioøkonomisk status og adgang til sundhedspleje [2].

Gennem årene har der været en ophobning af beviser til fordel af en betydelig arvelig komponent i PCa modtagelighed, men jagten på PCA gener har givet nogle ensartede resultater. For nylig har genom-dækkende forbindelsesled, associerings- og iblanding kortlægning scanninger opdaget risiko loci på kromosomerne 2p15, 3p12, 6q25, 7q21, 8q24, 10q11, 11q13, 17q12, 17q24, 19q13, 22q13 og Xp11 [3] (se også GWAS katalog: https://www.genome.gov/gwastudies/), selv polymorfe varianter i disse regioner tilsyneladende kun udgør en lille del af den observerede genetiske disposition til PSA.

for at bestemme, om de sundhedsmæssige uligheder mellem afrikanske amerikanere og europæiske amerikanere kan delvis forklares ved forskelle i genetisk baggrund søgte vi efter alleler med store frekvens forskelle mellem disse befolkningsgrupper, der også har en incidens på modtagelighed for PSA.

i en indledende screening af 21 herkomst informative markører ( mål) på kromosom 12 i 368 African American PCA sager og kontroller fandt vi en indikation af forening på tværs af en udvidet region (fra 23 Mb til 64 Mb). Vi øgede stikprøvestørrelsen og dækning af kromosomet med yderligere mål og SNPs i et forsøg på at indsnævre området af interesse, og hvis det er muligt, at identificere den kausale variant. Særligt hensyn blev givet til vitamin D-receptoren (

VDR

, OMIM * 601.769) gen, som ligger på kromosom 12q13.11, da det er en sandsynlig kandidat og tidligere rapporter har vist en sammenhæng mellem polymorfier i dette gen og PCa [4].

Materialer og metoder

emner

Fem hundrede og halvtreds ubeslægtede African American sager og kontroller blev inkluderet i undersøgelsen. Rekruttering for både patienter og raske kontrolpersoner fandt sted på Howard University Hospital i Washington, DC, gennem afdelingen for Urologi og prostatakræft screeningsprogrammer.

PSA niveauer og andre kliniske vurderinger blev bestemt for alle PCA tilfælde og alle kontroller . Prostata cancer patienter havde ikke mere end en første grads slægtning med PSA. Alle kontroller havde en normal digital rektal undersøgelse.

Sygdom aggressivitet blev defineret på grundlag af TNM stadie og Gleason klasse. Lav aggressivitet blev bestemt ved en T kategori T2C og en Gleason kvalitet 7. Omvendt blev høj aggressivitet kendetegnet ved en T kategori ≥T2c og en Gleason klasse ≥7. Undersøgelsen blev godkendt af Howard University og University of Chicago hospitaler Institutional Review Board og af alle deltagere, der har givet skriftligt informeret samtykke.

Genomisk DNA blev opnået fra perifere blodprøver ved hjælp af standard teknikker.

Genotypebestemmelse

et sæt af 124 herkomst informative markører (AIMS) placeret på kromosom 12, hvoraf de fleste blev udvalgt fra en offentliggjort blanding kort skræddersyet til afroamerikanere [5], blev genotype i tilfælde og kontroller, og bruges til at estimere lokal herkomst. Derudover blev individuelle iblanding proportioner estimeres ved en række 103 genom-dækkende AIMS valgt blandt det samme panel. Personer, der tilhører hver forældrenes befolkning, dvs. HapMap Yoruba (Yri) og CEPH (CEU), blev også indtastet for disse markører.

Derudover har vi genotype femten SNPs i to gener, der er involveret i vitamin D-metabolisme, elleve på vitamin D-receptoren (

VDR

) og fire på

CYP27B1

(OMIM * 609.506).

Endelig genotyper for en yderligere række 55 SNPs på kromosom 12 blev indsamlet og analyseret i et forsøg på at afgrænse de tilknyttede områder til specifikke gener.

Illumina BeadLab platform [6] blev brugt til at genotype alle formål i dette projekt.

VDR

,

CYP27B1

alle SNPs anvendes til finere kortlægning blev analyseret med Sequenom MassArray platform [7].

Alle fysiske positioner og SNP detaljer rapporteret i den aktuelle undersøgelse var baseret på NCBI genom bygge 36 og dbSNP bygge 130.

Dataanalyse

programmet STRUKTUR v2.2 [8] blev kørt til at estimere individuelle og locus-specifik afstamning. Til vores analyse af antallet af forældrenes populationer blev fastsat til to. Kører bestod grundlæggende af 30000 burn-ins og 70000 gentagelser, og 5000 iblanding burn-ins når det er nødvendigt. For at indsamle data på stedet-for-site (lokal) herkomst vi brugte koblingen model, mens en model, der bruger befolkningen oplysninger fra forældrenes individers genotyper blev valgt for at opnå individuelle herkomst proportioner.

Bindingsuligevægt (LD) mønstre langs kromosom 12 blev undersøgt med programmet Haploview V4.2 [9]. Udvælgelse af tagSNPs blev også gjort med Haploview bruge Yri som reference befolkning, parvis tagging og ar

2 tærskel på 0,8.

Binary logistisk regression blev anvendt til at estimere odds ratio (OR) og 95% sikkerhed intervaller (CI) for sammenslutningen af ​​de enkelte markører og haplotyper med PSA med justering for alder, individuel og lokal herkomst, via programmer SPSS v15 og Plink 1,07 [10]. Power beregninger blev udført med programmet Genetic Power Calculator [11].

Funktionel

i silico

analyse af genvarianter for at identificere ændringer i transskription faktor bindingssteder, 5’UTR og 3’UTR motiver og bevaring på tværs af arter blev udført ved hjælp af de programmer, der indgår i Génépi værktøjskassen [12].

Resultater

i alt 669 personer blev indgået i analysen, herunder 253 African American PCA patienter , 297 African American kontroller, 59 West afrikanere (HapMap Yri) og 60 europæere (HapMap CEU). Kliniske og demografiske karakteristika African American prøve er vist i tabel 1.

Efter at eliminere markører med mere end 50% manglende genotyper, mindre end 5% mindre allel frekvens (MAF), ud af Hardy- Weinberg ligevægt i kontrollerne (p 0,0005), tæt knyttet til andre ( 0,1 cm intermarkør afstand)., 76 kromosom 12 mål og 88 genom-dækkende mål blev analyseret (tabel S1 og S2)

Baseret på magt analyserer vi havde i gennemsnit -70% effekt (36-83%) for at påvise en genotype relativ risiko på 1,5 på en alfa-niveau på 0,05 for varianter med en mindre allel frekvens ≥5%, under forudsætning af markøren er i fuldstændig LD med den kausale variant og en prævalens på PCa i afroamerikanere på 2,5%. Hvis alle varianter blev overvejet, magt faldt til -60% (8-83%) på grund af det faktum, at der er begrænset magt at detektere effekten af ​​varianter med frekvenser under 5% (22% effekt i gennemsnit), se tabel S3.

Stamtræ og befolkningsstruktur

Brug af sæt af genom-dækkende mål betyde allel frekvens forskel (delta) mellem forældrenes befolkninger blev fundet at være 74%, der strækker sig fra 55% til 96% ( tabel S2). STRUKTUR kørsler etableret to som det mest sandsynlige antal klynger inden for afroamerikanere, uanset status, hvilket indikerer tilstedeværelsen af ​​befolkningen lagdeling. Gennemsnitlig europæiske individuel herkomst (± sd) var 22 ± 17% for hele stikprøven, svarende til tidligere rapporterede estimater for denne population [13]. PCA sager havde i gennemsnit højere vestafrikanske afstamning end kontroller (79% vs. 77%), selv om forskellen ikke var signifikant (tabel 1). Patienterne var væsentligt ældre end kontroller (p 0,001, tabel 1).

Association med status sygdom

Vores indledende analyse ved hjælp 242 tilfælde og 126 kontroller fandt, at tre ud af 21 målsætninger var signifikant associeret med sygdomsstatus efter justering for alder og individuel herkomst (p 0,05, tabel 2)., mens en anden AIM var tæt på signifikans (rs1963562, p = 0,07)

for yderligere at undersøge disse forening signaler vi udvidet kromosom 12 AIM sæt med 75 ekstra polymorfier og øget stikprøvestørrelsen til i alt 550 personer. Mean allel frekvens forskel mellem West afrikanere og europæere for denne udvidede sæt AIMS var 70% (interval: 24% -95%), og den gennemsnitlige afstand mellem markører var 1,25 Mb (tabel S1). Dækning af kromosomet forlænget fra 0,2 Mb til 131,2 Mb. Meget få markører for denne AIM panel er i LD i hele regionen, og dem, der gør vise lav R

2 værdier. Dette forventes i nogen grad som varianter blev udvalgt til at sikre fravær af LD i de parentale populationer.

Association med PCa blev afsløret i ti nye markører på en alfa-niveau på 0,05, justering for alder og individuel herkomst, selv om ingen opnåede betydning, hvis anvende en Bonferroni korrektion for multiple test (p 0,0007, tabel S1). Interessant for alle loci, den hyppigste allel blandt europæerne var også allel bibringer risiko for PSA.

Vi valgte 55 ekstra SNPs inden for de tilknyttede regioner og nabolandet kandidatgener for at forsøge at lokalisere kilden til foreningen signal . Præference blev givet til tagSNPs som defineret af programmet Haploview i Yri befolkning. Dette blev gjort i to etaper, blev 20 SNP’er indtastet og analyseret først og på grundlag af disse og tidligere resultater blev 35 flere varianter tilføjet, især i generne

TMTC1

,

HMGA2

(OMIM * 600.698) og

PAWR

(OMIM * 601.936), der viste den stærkeste tilknytning til PCA (tabel S1 og S4). Seks SNPs var invariant i denne population, mens tre var ude af Hardy-Weinberg ligevægt (p 0,002), blev derfor 46 polymorfier medtaget i den endelige analyse, hvoraf fire var signifikant associeret med PCa (en i

HMGA2

og tre i

PAWR

). Vi har ikke forfølge

HMGA2

forening yderligere da rs17179670 er en intron variant, er det eneste polymorfi forbundet til sygdom inden dette gen og foreningen signalet er ikke særlig stærk (p = 0,03).

den PAWR gen omegn

efter alle runder af analyse rs12827748, som ligger opstrøms for

PAWR

gen, forblev den mest signifikant associeret SNP, selv efter justering for alder og individuel herkomst (p 0,01). Dette SNP viser en stor frekvens forskel mellem europæiske og vestafrikanske befolkningsgrupper (C allel: 0,63 vs 0,01, henholdsvis), mens frekvensen af ​​den samme allel i PCA tilfælde er 0,18 sammenlignet med 0,11 i kontrol (tabel S4). For at eliminere tilføjet confounding efter herkomst vi medtaget lokale herkomst skøn i regressionsmodellen.

Lokal herkomst på rs12827748 blev vurderet ved hjælp af AIM rs10778691, som var den nærmeste til rs12827748 (fjernt ~130 kb), og viste, at sandsynligheden for to europæiske kromosomer på dette locus var større i tilfælde end i kontrollen, selv om resultatet ikke var signifikant (8,3% vs. 7,6%, p = 0,74). Yderligere justering for lokal herkomst ikke eliminere betydningen af ​​sammenhængen mellem rs12827748 og PCa (OR 1,6; 95% CI, 1,1-2,4; p = 0,02, tabel 3).

To andre

PAWR

SNPs var også signifikant (rs8176908, rs8176882, s 0,05, tabel 3 og S4), de mindre alleler er helt fraværende i de europæiske befolkninger og har en lavere end 10% frekvens blandt West afrikanere. Men når alle tre markører er inkluderet i logistisk regression, med alderen, individuelle og lokal herkomst som kovariater, kun rs12827748 udviser en signifikant sammenhæng (p = 0,03). Linkage uligevægt er stærk mellem rs8176908 og rs8176882 men svagere mellem nogen af ​​disse og rs12827748 (data ikke vist).

haplotyper konstrueret ved hjælp af tre

PAWR

polymorfier viste en stærk beskyttende effekt af TGG haplotypen (p = 1,7 × 10

-4), mens de haplotyper, der omfattede alle europæiske alleler (dvs. alleler, der har en højere frekvens i europæisk end i Vestafrikanske befolkninger, CGG) eller alle vestafrikanske alleler (TCT) øgede risikoen betydeligt af sygdom (tabel 4). Kun TGG haplotypen forblev signifikant efter korrektion for multiple test ved permutation analyse.

Vi vurderede

i silico

den indvirkning, som rs12827748 kan have på gen-funktion og fandt ingen afbrydelse af transskription faktor bindingssteder eller andre regulerende virkninger. Dette er en intergenisk SNP, der ligger mellem

PAWR

PPP1R12A

og det kan være i bindingsuligevægt med funktionelle varianter i enten genet, selv om

PAWR

som tumorsuppressor er en mere sandsynlig kandidat. Ikke desto mindre, LD mønstre i HapMap populationer CEU og Yri viser, at rs12827748 kan findes inden for en stor blok, der indeholder alle

PAWR

og dens opstrøms region med en skarpskåret adskillelse fra den blok, der indeholder

PPP1R12A

som forventet, vi bemærkede, at bærere af rs12827748 C-allelen viste signifikant højere betyde europæisk herkomst end individer med TT genotypen (0,30 vs 0,20, p 0,005)., men der var ingen forskel på herkomst mellem cases og kontroller inden for hver genotype gruppe. Men hvis individer er udvalgt på baggrund af lokale herkomst niveauer, for eksempel ved at begrænse prøven til de personer med en højere end 95% sandsynlighed for at have to europæiske kromosomer på rs10778691 (N = 32) eller til dem, bærer rs12827748 CC-genotypen (N = 21), cases viser en betydeligt forhøjet global vestafrikanske herkomst (54-66% vs. 32-34% i kontroller), selv om det stadig lavt i forhold til gennemsnittet af den fravalgt prøve (78%). På trods af stikprøvestørrelser bliver helt små forskelle er signifikante (p = 0,03 og 0,01). Dette tyder på, at der sandsynligvis er yderligere faktorer, arvet fra den vestafrikanske forfader, der disponerer for PCa

D-vitamin relaterede gener:. VDR og CYP27B1

Den aktive form af vitamin D (1,25 ( OH)

2D

3) reducerer proliferation og fremmer differentiering, og har været impliceret i cancere i colon, bryst og prostata. Samtidig er det blevet rapporteret, at individer af vestafrikansk afstamning har omtrent dobbelte lavere niveauer af serum-vitamin D (25 (OH) D, den vigtigste cirkulerende metabolit) end af overvejende europæisk herkomst [14], hvilket kan indebære mindre beskyttelse fra kræft til førstnævnte. Det er blevet foreslået, at polymorf variation inden gener i D-vitamin vej, såsom

VDR

, kan bidrage til de observerede forskelle i PCA satserne mellem populationer af forskellig oprindelse.

Flere undersøgelser har undersøgt variation i

VDR

i søgen efter en forening med forskellige typer af kræft. Der er seks almindeligt studerede polymorfier i

VDR

: CDX2 variant i promoteren (rs11568820), Fokl på exon 2 (rs2228570), BsmI om intron 8 (1.544.410), Apal også intron 8 (rs7975232), TaqI på exon 9 (rs731236), og poly-A-mononukleotid gentagelse på 3’UTR af genet. Taql er i stærk LD med de andre markører i regionen (BSMI, Apal og poly-A-mikrosatellit). Polymorfier i den 5′-regulatorisk region er kendt for at påvirke den transkriptionelle aktivitet af genet henviser polymorfismer i 3’UTR har været forbundet med stabiliteten af ​​mRNA [15]. Resultater for PCa har været i strid med nogle undersøgelser, der viser positive foreninger og andre postulere ingen effekt [16] – [19]. En forening med avanceret PCa er også blevet rapporteret, dvs. Gleason klasse ≥7 [20].

Da to af generne i vitamin D-vej, nemlig

VDR

og

CYP27B1

, er placeret på kromosom 12, vi undersøgte dem nærmere ved at skrive et par SNPs i dem.

CYP27B1

koder for enzymet 1-α-hydroxylase, der katalyserer omdannelsen af ​​25 (OH) D i 1,25 (OH)

2D

3. Polymorfe varianter i dette gen er blevet gennemgået, men fandt ikke at være forbundet med PCa [21]. Nærmere oplysninger om SNPs maskinskrevne er givet i tabel 5. Forening med sygdommen blev set for to tæt forbundet

VDR

SNP’er, rs731236 (Taql) og rs7975128 (p 0,05, tabel 3 og 5), og deres haplotyper ( tabel 6). Men justering efter alder og individuel herkomst fjernet betydningen af ​​foreninger. Ingen effekt af

CYP27B1

varianter på PCa risiko var tydelig i denne undersøgelse.

Diskussion

Vi har screenet kromosom 12 i jagten på alleler, der prædisponere afroamerikanere for indtræden og udvikling af PCa, og som delvis kan forklare forskellene i forekomst og dødelighed mellem afroamerikanere og europæiske amerikanere. Efter omhyggelig styring for effekterne af individuelle og lokale afstamning identificerede vi en polymorfi (rs12827748) placeret opstrøms for

PAWR

gen, der væsentligt øget modtagelighed for PSA. C-allelen, som giver risiko, er sjældne i West afrikanere, men er den største allel i de europæiske befolkninger. To ekstra

PAWR

SNP’er (en intron, en synonym) blev også forbundet med PCa i det indre markør analyse, men inddragelsen af ​​de tre polymorfier i regressionsmodellen elimineret al betydning bortset rs12827748. Da de to sidstnævnte varianter er kun til stede i populationer af vestafrikansk afstamning, de kan også repræsentere PCA risikofaktorer at på grund af deres lavere frekvenser ikke detekteres som uafhængigt signifikante signaler. Der er så mulighed for, at denne region huser modtagelighed faktorer fra EU samt vestafrikansk oprindelse, og i en blandet population som afroamerikanere begge af dem kunne være på arbejde.

Det er også interessant at bemærke, at alle de tilknyttede SNPs var faktisk lavfrekvent varianter med frekvenser omkring eller under 10% i kontroller. Odds ratio svarende til disse varianter interval på 1,6 til 2,8, højere end de normalt rapporteret i genom-dækkende associationsstudier. På grund af den relativt lille størrelse af vores undersøgelse er der ikke strøm nok til at detektere effekten af ​​sjældne varianter (dvs. dem med frekvenser på under 1%), og derfor ikke kan se bort fra dem som potentielle PCA årsagsfaktorer. Tilsvarende kan betydningen af ​​varianter med frekvenser under 5% er blevet undervurderet på grund af utilstrækkelig effekt.

PAWR

eller prostata apoptose respons gen er placeret på kromosom 12q21 og er højt udtrykt i den prostata. Det fremmer apoptose og forårsager tumorregression, og dets nedregulering fremgår under tumorigenese [22]. Men tabet af

PAWR

er ikke nok til at forårsage PCa i

PAWR

null mus men så når kombineret med samtidig

PTEN

heterozygositet [23]. Vores resultater tyder på, at

PAWR

kan være en lav penetrans PCa modtagelighed gen og fortjener yderligere undersøgelse i andre populationer og med hensyn til andre PCa relaterede fænotyper. Relevansen af ​​disse fund vil dog kun være bestemt af deres replikation i efterfølgende undersøgelser, som vi ikke kan ignorere det faktum, at undersøgelser med små stikprøvestørrelser er på et højere risiko for at rapportere falske positive associationer [24].

Det begrænsede antal sager og kontroller også påvirket vores evne til at gennemføre en formel iblanding kortlægningsundersøgelse på kromosom 12, da der er reduceret magt til at opdage en mindre end 2 gange risiko på grund af herkomst [25].

Vi har detekteret en marginalt signifikant sammenhæng af PCa med to SNPs i

VDR

gen, herunder TaqI polymorfi. I modsætning til hvad der er blevet fundet i en nylig metaanalyse den mindre allel (C = t) ved TaqI var risikoen allel i vores undersøgelse, selv om metaanalyse signifikant sammenhæng blev identificeret ved at samle sammen europæisk, afrikanske og asiatiske befolkninger [4 ]. et nærmere kig på de data, stratificeret efter etnicitet viser dog, at mens C-allelen synes at være beskyttende i europæere og asiater det synes at give risiko i populationer af afrikansk afstamning [4]. De fleste af de undersøgelser, der analyserede TaqI i europæerne fandt ikke en signifikant effekt eller indberettet, at de store (T) allel øget modtagelighed for PCa [26], [27]. På den anden side, studier af VDR polymorfier i afroamerikanere med PCa er ret begrænsede, de fleste med små stikprøvestørrelser og dermed usikkert med hensyn til den rolle, Taql [26].

Endelig er det vigtigt at understrege, at den omhyggelige genom-dækkende vurdering af de forfædres oprindelse et blandet befolkning som afroamerikanere repræsenterer et værdifuldt middel til optrevling de genetiske risikofaktorer, der kan bidrage til eksistensen af ​​sundhedsmæssige uligheder.

Støtte Information

tabel S1.

Liste over 76 herkomst informative markører (mål) fordelt langs kromosom 12 anvendes til at estimere lokal afstamning og opdage association med prostatacancer

doi:. 10,1371 /journal.pone.0016044.s001

(DOC)

tabel S2.

Genome-wide herkomst informative markører (mål), der anvendes i forbindelse med vurdering af de enkelte herkomst proportioner i African American sager prostatakræft og kontroller

doi:. 10,1371 /journal.pone.0016044.s002

(DOC)

tabel S3.

Anslået magt til at opdage virkninger af kromosom 12 SNP’er

doi:. 10,1371 /journal.pone.0016044.s003

(XLSX)

Tabel S4.

Fifty-fem SNPs skrives i tidligere associerede eller ansøger kromosom 12 regioner

doi:. 10,1371 /journal.pone.0016044.s004

(DOC)

Tak

Vi står i gæld til alle undersøgelsens deltagere, og til Folasade Akereyeni og Chiledum Ahaghotu for deres uvurderlige hjælp med frivillige rekruttering.